Podzimní akce!
Koupit druhé baleníBinocrit 3000 IUse slevou 40%!
Dvě balení po 6 stříkačkách každé za 400 $ (12 stříkaček celkem 36 000 iu).
Akce je omezena na dostupnost akčního zboží.
Než si koupíte EPO v naší lékárně, přečtěte si o něm:
Erythropoietin je glykoproteinový hormon, přesněji cytokin, hlavní regulátor erytropoézy, který stimuluje tvorbu erytrocytů z pozdních prekurzorových buněk a zvyšuje výnos retikulocytů kostní dřeně v závislosti na příjmu kyslíku. Dokud není okysličování tkání narušeno, zůstává koncentrace erytropoetinu, stejně jako počet cirkulujících červených krvinek, konstantní. Produkce erytropoetinu je regulována na úrovni genové transkripce, a protože jediným fyziologickým podnětem ke zvýšení počtu buněk syntetizujících erytropoetin je hypoxie, produkce ani metabolismus erytropoetinu nezávisí na jeho koncentraci v plazmě. Zdravý člověk má ve svém těle přibližně 2,3*10^13 červených krvinek s průměrnou délkou života 120 dní. Proto by měla být zásoba erytrocytů v těle neustále obnovována rychlostí přibližně 2,3 buněk za sekundu. Diferenciační systém erytroidních buněk by měl být přísně regulován, aby byla za normálních podmínek udržována konstantní hladina cirkulujících erytrocytů. Tento systém by navíc měl být vysoce citlivý na změny v množství kyslíku v těle. V současné době existuje mnoho důkazů, že klíčovým faktorem, který zajišťuje kontrolu diferenciace buněk erytroidního rozsahu, je erytropoetin cirkulující v krvi.
Erytropoetin je extrémně aktivní hormon, který v těle působí v pikomolárních koncentracích. Malé výkyvy jeho koncentrace v krvi vedou k významným změnám rychlosti erytropoézy a normální rozmezí jeho koncentrací se pohybuje od 4 do 26 IU/l. Proto dokud koncentrace hemoglobinu není nižší než 105 g/l, koncentrace erytropoetinu nepřekračuje toto rozmezí a není možné detekovat jeho zvýšení (pokud neznáte jeho počáteční hodnoty). Erytrocytóza vede k potlačení produkce erytropoetinu mechanismem negativní zpětné vazby. To je dáno nejen zvýšeným přísunem kyslíku do tkání v důsledku zvýšeného počtu cirkulujících červených krvinek, ale také zvýšenou viskozitou krve. Pro sportovce to znamená snížení produkce vlastního hormonu při zavádění exogenního a narušení mechanismů regulace produkce erytrocytů. S využitím erytropoetinu jako dopingového činidla ve sportu by proto měl sportovec zvážit budoucnost produkce erytrocytů v těle.
Dopingové testy
Obvykle se erytropoetin nachází ve vzorcích moči nebo krve. Krev je pravděpodobněji detekována než moč. Poločas rozpadu je 5-9 hodin, tj. Pravděpodobnost detekce se po 2-3 dnech výrazně snižuje.
Jako maskovací prostředek se používá heparin. Používá se také injekce proteázy do močového měchýře katetrem.
Fyziologická role erytropoetinu
Po dlouhou dobu zůstala otázka buněk produkujících erytropoetin otevřená. To bylo způsobeno především nedostatkem přímých metod identifikace buněk syntetizujících hormon. Identifikace buněk byla prováděna nepřímými metodami, včetně schopnosti tkáňových kultur syntetizovat produkt in vitro. Věřilo se, že hlavními kandidáty na roli buněk produkujících EPO byly glomerulární buňky a buňky proximální části tubulů. Klonování genu pro erytropoetin, stejně jako vývoj metod hybridizace in situ, které umožňují přímo identifikovat buňky, ve kterých dochází k expresi určitých genů, změnilo představu o povaze buněk syntetizujících erytropoetin. Hybridizace in situ ukázala, že buňky, ve kterých je syntetizována mRNA erytropoetinu, nejsou glomerulární ani tubulární. Zdá se, že hlavním místem syntézy EPO v ledvinách jsou intersticiální buňky nebo kapilární endoteliální buňky. Jak již bylo uvedeno, hypoxie je hlavním faktorem regulujícím výrobu EPO. V podmínkách hypoxie se počet EPO cirkulujících v plazmě zvyšuje přibližně 1000krát a dosahuje 5-30 jednotek/ml. Četné experimenty s izolovanými ledvinami ukázaly, že obsahuje senzory reagující na změny koncentrace kyslíku.
Již v roce 1987 J. Schuster a jeho kolegové zkoumali kinetiku produktů erytropoetinu v reakci na hypoxii. Bylo ukázáno, že přibližně 1 hodinu po vzniku hypoxie se množství erytropoetinové mRNA v ledvinách zvyšuje a mRNA se dále hromadí po dobu 4 hodin. Když je odstraněna hypoxie, hladina EPO mRNA rychle klesá. Změny v množství plazmatického a renálního erytropoetinu detekované protilátkami specifickými pro erytropoetin jsou striktně paralelní se změnami v množství mRNA s odpovídajícím zpožděním. Výsledky získané v této studii naznačují, že de novo produkce EPO je stimulována během.
V laboratoři S. Konry v roce 1989 zkoumal proces indukce syntézy EPO pomocí metody hybridizace in situ na tkáňových řezech ledvinové kortikální látky. Bylo zjištěno, že při anémii byla produkce EPO významně zvýšena, i když intenzita hybridizace s EPO mRNA v jednotlivých buňkách zůstala nezměněna. Ukazuje se, že zvýšení produkce EPO je spojeno se zvýšením počtu buněk syntetizujících hormon. Jakmile se obnoví normální hematokrit, počet buněk syntetizujících erytropoetin rychle klesá a kinetika změny koreluje s kinetikou poklesu počtu mRNA EPO a cirkulujícího hormonu. Data z histologické analýzy naznačují, že EPO je syntetizován intersticiálními buňkami kortikální části ledviny.
Ukazuje se, že 5 až 15% plazmatického erytropoetinu u dospělých je extracelulárního původu. A pokud jsou hlavním místem syntézy erytropoetinu v embryích játra, jsou játra v dospělém těle také hlavním orgánem produkujícím EPO, ale extrarenálním. Tento závěr byl potvrzen v nedávných experimentech k detekci mRNA EPO v různých orgánech. Zdá se, že změna hlavního místa syntézy EPO během ontogeneze je geneticky podmíněná událost.
Syntéza erytropoetinu v těle je zprostředkována významným počtem biochemických kofaktorů a stimulantů. Předpokládá se, že hypoxie vede ke snížení hladiny kyslíku ve specifických senzorických buňkách ledvin, což způsobuje zvýšení produkce prostaglandinů v uzlových buňkách. Ukázalo se, že prostaglandiny hrají důležitou roli při stimulaci produkce erytropoetinu. Inhibitory syntézy prostaglandinů mají v případě hypoxie zdrcující účinek na produkci EPO. Hlavní příspěvek k biosyntéze prostaglandinů v hypoxii pravděpodobně přináší systém cyklooxygenázy. Při hypoxii (a také při zavádění iontů kobaltu) dochází k uvolňování neutrálních proteáz a lysozomálních hydroláz v ledvinách, které, jak bylo ukázáno, také stimulují produkci EPO. Uvolňování lysozomálních enzymů se zdá být spojeno se zvýšením produkce cGMF. Je ukázáno, že lysozomální enzymy jsou aktivovány proteinovými kinázami, které jsou zase aktivovány cAMP.
Při hypoxii je pozorována indukce aktivity fosfolipázy A2, což vede ke zvýšení hladiny arachidonátů, které se za účasti cyklooxygenázy mění na endoperoxidy. Bylo poznamenáno, že hypoxie je optimálním stavem aktivity cyklooxygenázy. Důležitou roli v těchto biochemických událostech pravděpodobně hraje systém vápníku: ionty vápníku stimulují aktivitu fosfolipázy A a tvorbu prostaglandinu. Prostonoidy zase mohou indukovat aktivitu adenylátcyklázy a spustit kaskádu biochemických dějů vedoucích k fosforylaci a aktivaci hydrolázy. Úloha hydrolázy a řetězce, která nakonec vede ke zvýšené syntéze EPO, zůstává nejasná. Některé hormony hypotalamo-hypofyzárního systému, hormony štítné žlázy a některé steroidní hormony jsou také aktivní při stimulaci biosyntézy EPO. Ionty kobaltu jsou specifickým induktorem produkce EPO a jejich mechanismus účinku na biosyntetický systém EPO zatím není jasný. Tento systém je atraktivním experimentálním modelem pro studium indukce biosyntézy EPO.
Molekula lidského erytropoetinu, ve které sacharidová složka tvoří 40-50 % molekulové hmotnosti (molekulová hmotnost glykoproteinu je 32-36*10^3 hod. A odhadovaná molekulová hmotnost proteinové části je 18 399* 10^3 u), sestává ze 193 aminokyselinových zbytků. EPO hodnota izoelektrického bodu je nízká (pH 3,5-4,0), což je způsobeno přítomností kyselin sialových v koncových polohách uhlovodíkových řetězců erytropoetinu. Izoelektrická fokusace plazmatického EPO v polyakrylamidovém gelu umožňuje odhalit několik frakcí, shodných v molekulové hmotnosti, ale lišících se velikostí jejich izoelektrických bodů, což svědčí o heterogenitě ve struktuře uhlohydrátové části hormonu. Odštěpení sialových kyselin během léčby neuraminidázou nebo kyselé hydrolýzy vede ke ztrátě hormonální stability in vivo, ale neovlivňuje její aktivitu in vitro. Na čtyřech místech jsou k proteinovému řetězci připojeny glykosidové zbytky, které mohou představovat různé cukry, takže existuje několik druhů EPO se stejnou biologickou aktivitou, ale mírně odlišnými ve svých fyzikálních a chemických vlastnostech.
Analýza aminokyselinové sekvence lidského erytropoetinu odhalila tři potenciální N-glykosylační místa, která zahrnují konsensuální sekvenci Asn-X-Ser/Thr. V experimentech na ošetření hormonu N-glykosidázou, která specificky štěpila oligosacharidové řetězce spojené s asparaginovým zbytkem N-glykosidové vazby, bylo potvrzeno, že v molekule EPO byla nalezena tři N-glykosylační místa. V důsledku experimentů na zpracování hormonu O-glykosidázy bylo zjištěno, že také obsahuje oligosacharidové řetězce spojené s proteinovou částí pomocí O-glykosidických vazeb.
Gen erytropoetinu (gen: [07q21/EPO] erythropoietin) se skládá z pěti exonů a čtyř intronů. Gen kóduje protein sestávající ze 193 aminokyselinových zbytků. Byly identifikovány čtyři typy rnA, které se podílejí na interakci s genem erytropoetinu, z nichž dva jsou zastoupeny v extraktech po zavedení chloridu kobaltu v mnohem menším počtu kopií než v normálních extraktech. Tato data naznačují přítomnost negativních regulačních faktorů (pravděpodobně ribonukleoproteinů) zapojených do regulace exprese genu pro erytropoetin. Předpoklad negativní regulace exprese genu EPO potvrdili Semenza G. a kolegové v roce 1990, kteří získali sérii transgenních myší kódujících lidský gen EPO a různé fragmenty S-lemující oblasti. Analýza genové exprese v různých transgenech umožnila identifikovat tři regulační prvky genu pro lidský erytropoetin:
pozitivní regulační prvek požadovaný pro indukci exprese genu pro erytropoetin v játrech;
negativní regulační prvek;
regulační prvek požadovaný pro indukovatelnou expresi genu v ledvinách.
Experimentálně bylo ukázáno, že existují dvě místa pro iniciaci transkripčního genu pro erytropoetin, která nesou mnoho iniciačních míst. Za normálních podmínek je transkripce zahájena z omezeného počtu míst umístěných na obou místech. Pokud je anémie indukcí nebo léčbou chloridem kobaltu, počet funkčních míst zahájení transkripce na obou místech se zvyšuje. Produkce erytropoetinu je ve všech případech omezena obtížemi souvisejícími s izolací a kultivací buněk, nestabilitou produkce hormonů a nakonec její nízkou koncentrací v kulturních tekutinách.
Zásadně odlišný přístup k získávání velkého množství vysoce purifikovaného EPO byl spojen s použitím metod genetického a buněčného inženýrství. Byl učiněn pokus vytvořit bakteriálního producenta erytropoetinu. Protein produkovaný v Escherichia coli je rozpoznáván protilátkami proti EPO a má molekulovou hmotnost přibližně odpovídající deglykosylovanému lidskému EPO. O bakteriálních buňkách je známo, že mají glykosylační systém, který se zásadně liší od eukaryotických buněk. Proto není možné získat správně glykosylovaný protein v bakteriálních buňkách. V případě EPO má zásadní význam získání správně glykosylovaného glykoproteinu. Proto je vytvoření producenta hormonů na základě bakteriálních buněk neúčelné. Účinnou produkci biologicky aktivního erytropoetinu in vitro a in vivo lze získat pouze na základě buněk vyšších zvířat.
Ve studii vlastností rekombinantního EPO bylo prokázáno, že přítomnost nekompletní uhlohydrátové složky (molekulová hmotnost erytropoetinu syntetizovaného v tomto systému je 23*10^3 u) neovlivňuje aktivitu hormonu in vitro, ale významně snižuje jeho aktivitu in vivo. Kompletní odloučení sacharidů s glykosidázou současně vede k 80% ztrátě biologické aktivity hormonu v testu in vitro. Tyto údaje jsou v rozporu se stávajícími představami, že sacharidová složka EPO není nezbytně nutná pro její aktivitu in vitro.
Historická poznámka
V roce 1989 byla provedena podrobná analýza struktury rekombinantního EPO získaného transfekcí buněk z vaječníku čínského křečka do genomu lidského EPO. Bylo zjištěno, že v buňkách jsou syntetizovány dva typy EPO (nazývané bi- a tetraformy), které se liší stupněm větvení N-vázaných uhlovodíkových řetězců. Bi-forma EPO obsahující méně rozvětvenou uhlohydrátovou složku se svou biologickou aktivitou výrazně liší od nativního erytropoetinu používaného jako standard: biologická aktivita bi-formy EPO in vivo je 7krát nižší a in vitro- 3krát vyšší. Biologická aktivita tetraformového EPO je velmi blízká aktivitě nativního EPO. Tato data ukazují na významnou úlohu struktury uhlohydrátových složek v biologické aktivitě erytropoetinu in vivo. Vyšší aktivita in vitro těchto forem erytropoetinu obsahujícího neúplnou sacharidovou složku je zjevně spojena se usnadněním interakcí erytropoetinu s receptory. Současně se zdá, že právě sacharidová složka zajišťuje stabilitu hormonu v těle a v souladu s tím i vysokou úroveň biologické aktivity in vivo testů.
V polovině 80. let byl první rekombinantní erytropoetin získán zavedením lidského genu EPO (lokalizovaného u lidí na sedmém chromozomu v oblasti 11q-12q) do buněk křeččích vaječníků. Rekombinantní lidský p-EPO získané genetickým inženýrstvím (rekombinace) je ve složení aminokyselin totožné s přirozeným lidským EPO. Recorpone poskytuje flexibilní a nákladově efektivní metodu efektivní léčby anémie v kombinaci s vysokým bezpečnostním profilem a vynikající snášenlivostí. Díky použití rekrmonu se výrazně snižuje potřeba hemotransfúzí, které jsou dnes nejběžnější metodou korekce anémie. Podle četných studií tedy použití rekrmonu umožňuje obnovit normální hladinu hemoglobinu a eliminovat potřebu substitučních hemotransfuzí u pacientů s rakovinou trpících anémií. Současně dochází k výraznému zlepšení kvality života těchto pacientů; riziko infekce, které existuje během korekce anémie pomocí hemotransfuzí při léčbě virových infekčních onemocnění, jako je HIV a hepatitida C, je výrazně sníženo. Recorpone je k dispozici jako praktické zařízení pro podávání a indikaci léčiva (injekční stříkačka).
Současně existují nevýznamné rozdíly ve složení glykosidových zbytků, které ovlivňují fyzikálně -chemické vlastnosti celé molekuly hormonu. Byly tedy například nalezeny určité rozdíly v distribuci elektrického náboje pro určité typy erytropoetinu. Erythropoietin vyrábí různé farmaceutické společnosti v pěti typech: alfa, beta, retard (NESP a CERA), theta a omega.
Alpha EPO a beta EPO se používají od roku 1988. U subkutánních injekcí je jejich biologická dostupnost asi 25%, maximální koncentrace v krvi je 12-18 hodin, poločas je až 24 hodin (s intravenózní injekcí-5- 6 hodin). Erythropoietin retard (NESP a CERA) se používá v posledních několika letech a je účinnější než jiná léčiva EPO. Theta EPO je dnes považován za nejúčinnější a nejméně alergenní s nejvyšším stupněm čistoty. To je způsobeno skutečností, že se získává metodami genetického inženýrství v lidských buňkách (někteří bezohlední sportovci a sportovní lékaři se domnívají, že to dělá to nezjistitelné). Ve skutečnosti je theta EPO pouze z 99% identický s lidským. Omega-epo, které se získává z křeččích ledvin, se nejvíce liší od ostatních léků EPO u lidí, takže je nejsnadněji zjistitelné. Prodává se pouze ve východní Evropě a Jižní Americe.
Erytropoetinové přípravky
Rekombinantní biologicky podobné a-EPO od různých výrobců, dokonce i ty, které schválil Výbor pro humánní léčivé přípravky (CHMP) Evropské agentury pro humánní léčivé přípravky, mohou mít různé vlastnosti, čistotu a hlavně odlišnou biologickou aktivitu. Když byli analyzováni různí výrobci erytropoetinu, 5 z 12 studovaných produktů vykazovalo významné odchylky v síle účinku mezi různými sériemi, ve třech vzorcích - nepřijatelné hladiny bakteriálních endotoxinů.
Další studií bylo srovnání 11 produktů EPO (obdržených od osmi výrobců) dostupných na trzích mimo EU z hlediska obsahu, síly a izoformního složení účinné látky (erytropoetinu). Bioaktivita in vitro se pohybovala od 71 do 226%, přičemž 5 vzorků nesplňovalo specifikace. Mezi odchylky v isoformové kompozici patří: přítomnost jedné nebo více dalších kyselých a/nebo zásaditých izoforem, jakož i změněný kvantitativní poměr různých izoforem. Byly také identifikovány mezisériové rozdíly; některé výrobky nesplňovaly jejich vlastní specifikace, tj. výrobci neposkytovali adekvátní kontrolu výrobních procesů. Množství aktivní složky také nebylo vždy v souladu s uvedeným množstvím. Takové odchylky od deklarovaných parametrů mohou mít důležitý klinický význam, protože mohou vést k předávkování nebo naopak k nižší dávce. Poskytnutá data jasně ukazují na hrozbu použití rekombinantních erytropoetinů bez lékařské indikace.
Lékařské aplikace
V lékařské praxi se erytropoetin používá k léčbě anémie různého původu, včetně pacientů s rakovinou s chronickým selháním ledvin. Protože, jak bylo uvedeno výše, endogenní erytropoetin se tvoří v ledvinách v těle, pacienti s chronickým selháním ledvin vždy trpí anémií. Kromě toho je pokles koncentrace EPO v lidské plazmě a následně počet červených krvinek pozorován u následujících patologických stavů a chorob:
sekundární polycytémie;
Nedostatečná stimulace vlastního EPO;
benigní onemocnění ledvin (hydronefróza);
obecná tkáňová hypoxie;
Porucha krevního zásobení ledvin
Snížená koncentrace kyslíku v životním prostředí;
Chronická obstrukční plicní nemoc;
Kardiovaskulární onemocnění (zprava doleva);
anomálie ve struktuře molekuly hemoglobinu (srpkovitá anémie);
Účinky kouření na tělo oxidů uhelnatých;
Arterioskleróza renální tepny;
odmítnutí štěpu;
aneuryzma ledvin.
Před objevením se rekombinantního erytropoetinu byli tito pacienti pravidelně podrobováni hematransfuzi plné krve i erytrocytové hmoty. Od roku 1989 však již takové postupy nejsou nutné, protože byly nahrazeny přípravky z erytropoetinu. V některých případech je anémie jiného původu také úspěšně léčena rekombinantním EPO. Skutečnost, že zavedení rekombinantního EPO indukuje další erytropoézu i při plně intaktní endogenní úrovni EPO, využívají autologní dárci krve. Jako alternativa k erytrocytové hromadné transfuzi je terapie vysokými dávkami EPO účinným antianemickým opatřením jako doprovodná terapie při léčbě chronické polyartritidy, AIDS, některých nádorů a také při řadě chirurgických zákroků. Geneze hypertenze jako vedlejšího účinku terapeutického použití rekombinantního EPO je stále nejasná. Při provádění hemodialýzy u pacientů se erytropoetinové léky obvykle podávají intravenózně. V některých případech může být stejný lék podán subkutánně.
Zvýšení počtu červených krvinek pod vlivem erytropoetinu následně vede ke zvýšení obsahu kyslíku na jednotku objemu krve a v důsledku toho ke zvýšení kyslíkové kapacity krve a dodání kyslíku do papírové kapesníky. V konečném důsledku se zvyšuje vytrvalost těla. Podobných účinků je dosaženo při tréninkových cvičeních ve středních horách, kdy nedostatek kyslíku ve vzduchu způsobuje stav hypoxie, který stimuluje produkci endogenního EPO. Ve srovnání s použitím rekombinantního léčiva je přirozeně hypoxický trénink fyziologickým mechanismem regulace erytropoézy a zlepšení funkce transportu kyslíku hemoglobinu, což je účelem použití EPO jako dopingového činidla.
Vlivem erytropoetinu na kapacitu kyslíku a transport kyslíku v tkáních způsobuje tato látka zvýšený výkon při sportech s převládajícím projevem aerobní vytrvalosti. Tyto sportovní disciplíny zahrnují všechny druhy atletického běhu od 800 m, stejně jako všechny druhy lyžařských a cyklistických závodů. Publikace o kulturistice navíc nedávno začaly ukazovat, že EPO může nahradit masové užívání anabolických steroidů. Epo léčiva se používají v kombinaci se stanazolem, inzulínem a somatotropinovým hormonem (HGH).
Erytropoetinové přípravky jsou dobře tolerované farmakologické látky, které nemají téměř žádné vedlejší účinky. Předávkování EPO a nekontrolované používání však může vést ke zvýšení viskozity krve a následně ke zvýšení rizika poruch krevního oběhu až k periferní vaskulární trombóze a plicní embolii, která obvykle vede k úmrtí. Riziko těchto vedlejších účinků EPO se zvyšuje s tréninkem ve středních horách, stejně jako s dehydratací.
Existují však důkazy, že dlouhodobé užívání přípravků z erytropoetinu může být nebezpečné pro zdraví a někdy i pro život. Zejména je použití EPO spojeno s neustálými bolestmi hlavy u sportovců kvůli srážení krve a poruchám krevního oběhu v mozku. Kromě toho může být narušen metabolismus železa: potřeba železa v těle se zvyšuje, když je v játrech relativně malá zásoba železa. Když se vstříkne exogenní železo, začne se ukládat v játrech, takže cirhóza jater spojená s přebytkem železa se projeví po 20-25 letech.
Erytropoetin ve sportu
Historie použití rekombinantního erytropoetinu ve sportu (běžně používaný ve vědecké literatuře jako rHuEPO, r-HuEPO, rhu-EPO, rEPO) sahá do roku 1977, kdy byl erytropoetin poprvé izolován z lidské moči ve své purifikované formě. Zavedení a kontrola erytropoetinu ve sportu a soutěži jako zakázané drogy probíhala v následujících fázích:
1985 - klonován gen EPO;
1987 - rekombinantní erytropoetin byl poprvé k dispozici v Evropě;
1987-1990. - Několik úmrtí mezi holandskými a belgickými cyklisty je přičítáno používání EPO;
1988 - Mezinárodní lyžařská federace zahrnula erytropoetin do svého dopingového seznamu;
1989 - FDA (Food and Drug Administration) - Vládní agentura, která kontroluje výrobu a distribuci drog v zemi, povoluje produkci rekombinantního EPO;
1990 - MOV zakazuje používání erytropoetinu;
1993-1994. - IAAF za aktivní účasti profesora M. Doniky zavádí postupy odběru krve na osmi soutěžích Světového poháru;
1997 - Mezinárodní cyklistická unie a Mezinárodní lyžařská federace schválily odběr krve před začátkem soutěže a stanovily limity pro hematokrit a hemoglobin. Přestože překročení těchto limitů není základem pro Zákaz činnosti, je určeno k ochraně těla Sportovce před potenciálními komplikacemi spojenými se zvýšeným hemoglobinem a hematokritem;
1998 - Zveřejnění použití erytropoetinu ve sportu na cyklistickém závodě Tour de France získalo rozsáhlé mediální pokrytí;
1999 - Byl zintenzívněn výzkum vývoje spolehlivé metody detekce EPO pro olympijské hry v Sydney.
Protože přírodní a rekombinantní erytropoetin má téměř identickou strukturu aminokyselin, je rekombinantní erytropoetin extrémně obtížné odlišit od jeho fyziologického analogu.
Inhalace xenonové inhalace se aktivně používá ke stimulaci sekrece erytropoetinu v Rusku. Na olympiádě v Soči 2014 mnoho ruských sportovců dostalo před začátkem soutěže inhalování xenonem. Tuto metodu Antidopingová agentura od května 2014 zakázala.
Dopingová kontrola
Současný arzenál metod pro stanovení erytropoetinu zahrnuje přímé i nepřímé přístupy. Přímá metoda je založena na identifikaci těchto nevýznamných rozdílů zjištěných při studiu přirozeného endogenního erytropoetinu a EPO získaného genetickým inženýrstvím. Někteří výzkumníci se zejména pokusili použít rozdíly v distribuci elektrického náboje, které byly stanoveny pro dva typy molekul ELISA. Na základě těchto rozdílů byly provedeny pokusy oddělit dva typy molekul pomocí metody kapilární elektroforézy. Ačkoli je toto oddělení v zásadě možné, vyžaduje velké množství moči (až 1 litr, což je pro praxi pochopitelně nepřijatelné).
Upřednostňují se nepřímé metody, které vyžadují pouze malé množství vzorků krve nebo moči. Příklady nepřímých metod pro detekci EPO jsou:
Odchylky od normálních úrovní v bioprostředí vzorku. Tato skutečnost znamená, že zjištěný přebytek hladiny EPO by se měl lišit od fyziologických nebo patologických odchylek. Použití tohoto kritéria je však možné pouze tehdy, pokud je rozsah variací dostatečně úzký ve srovnání s hodnotami, které jsou detekovány po exogenním podání léčiva. To druhé je možné pouze při použití krve jako vzorku pro dopingový test;
Registrace biochemických parametrů, jejichž hodnota závisí na koncentraci erytropoetinu. Tento přístup může být založen na měření obsahu séra v rozpustném receptoru transferinu (sTfR), jehož hladina se zvyšuje po zavedení rekombinantního EPO. K podobným změnám však dochází po tréninku ve středních horách;
stanovení fibrinu a produktů rozkladu fibrinogenu v moči po podání EPO.
V současné době je téměř nemožné spolehlivě identifikovat případy exogenní injekce erytropoetinu do těla. Ke kontrole se proto používají změny fyziologických parametrů krve, které jsou detekovány po zavedení EPO. Mezinárodní cyklistická unie tedy používá kritérium maximální hodnoty hematokritu (50% u mužů). Mezinárodní lyžařská federace stanovila maximální přípustné hodnoty hemoglobinu (165 g/l pro ženy a 185 g/l pro muže) a hladiny retikulocytů nejvýše 0,2%. Pokud budou tyto limity překročeny během předsoutěžního kontrolního postupu, bude dotyčný sportovec ze zdravotních důvodů vyloučen ze soutěže. Hemoglobin i hematokrit jsou však ukazatele, které jsou ovlivněny mnoha faktory. Zejména se oba tyto ukazatele mohou výrazně změnit i po jednom sezení průměrné objemové výdrže. Tyto ukazatele se navíc vyznačují výraznou individuální variabilitou. Jediný přebytek více než 50% hodnoty hematokritu tedy nemůže prokázat zneužívání erytropoetinu ve sportu.
Aby se zlepšila kontrola používání erytropoetinu jako dopingového činidla, zavedla WADA modus operandi Athlete Blood Passport. Blood Passport je jedním z vývojů WADA zaměřených především na detekci erytropoetinu a jeho analogů. Generuje jeden počítačový hematologický profil pro každého sportovce na základě 30 různých ukazatelů, nejprve v těch sportech, kde je vyžadována vytrvalost. K zavedení a zdokonalení programu certifikace krve se již připojilo deset zemí, včetně Švédska, Norska, Kanady a Německa. Ruská antidopingová agentura tuto iniciativu schvaluje, ale bude realizována po dokončení všech lékařských a právních aspektů.
WADA doporučuje použít Sysmex (Japonsko) nebo dceřinou společnost ERMA k provádění testů na krevním listu sportovce. Tato značka nejnovější generace plně automatických hematologických analyzátorů získala nejvyšší index důvěry v přesnost krevního obrazu.
Během intenzivních tréninků a profesionálních sportovních aktivit je nutné neustále provádět hematologickou analýzu ke stanovení počtu erytrocytů a jejich parametrů (objem, nasycení hemoglobinem), hemoglobinu a hematokritu. Hematokrit by neměl stoupnout nad 50% - to vede k zesílení krve, což je zase spojeno se zhoršením krevního oběhu ve svalech a vnitřních orgánech, zvýšeným rizikem trombózy (sklon k trombofilii lze posoudit pomocí markeru D-dimer). Kromě toho existuje potřeba úplné kontroly metabolismu železa (koncentrace železa v séru, celková a nenasycená vazebná kapacita železa, procento nasycení železa, transferin, feritin, C-reaktivní protein) a stanovení hladin kyseliny listové a vitaminu B12 v krev. Všechny tyto sloučeniny jsou nezbytné pro správnou erytropoézu a nemělo by být povoleno jejich nedostatek při sportovních aktivitách. Kromě výše uvedených testů je nutné kontrolovat i hladinu samotného erytropoetinu.
Kde koupit EPO?
Na našich webových stránkách si můžete koupit EPO s doručením po celém světě. Bez ohledu na to, ve které zemi žijete, obdržíte zásilku bez problémů na celnici a bez rizika ztráty peněz. K objednání nemusíte chodit k lékaři ani mít recept.
Vždy máme na skladě EPO několika typů a generací:
Epoetin Alfa ( Binocrit , Eprex , Eralfon , Epocrin, Procrit)
Epoetin beta ( Vero epoetin , Epostim , Erythropoietin Binnopharm , Recormon )
NESP ( Aranesp )
CERA ( Mircera )
Kolik stojí EPO?
Naše ceny EPO závisí na zemi původu léčiva, formě výroby (ampule/lahvičky/stříkačky) a také na pořizovací ceně.
Nejnižší cena začíná od 30 USD za jednu lahvičku 2000IU (vhodné pro zkušební objednávku).
Pro velkoobchodní zákazníky můžeme na požádání nabídnout hromadné ceny.
Dodávka EPO
Dodáváme EPO do všech zemí světa, včetně zemí s přísnými celními kontrolami. Jsme schopni zaručit dodání většiny našich produktů EPO bez celní kontroly. Pokud žijete v Austrálii, na Novém Zélandu, v Německu, ve Švýcarsku, Rakousku, Itálii nebo ve Spojených státech a už zoufale potřebujete EPO, jsme pro vás jedinou možností.
Na vaši žádost můžeme zajistit přímé nebo tranzitní doručení z Evropy (ceny a dostupné léky jsou projednávány individuálně).