Jesenska promocija!
Kupite drugi paket odBinocrit 3000 IUuz 40% popusta!
Dva pakiranja od po 6 štrcaljki za 400 USD (12 štrcaljki ukupno 36.000 iu).
Promocija je ograničena na dostupnost promotivne robe.
Prije nego što kupite EPO u našoj ljekarni, pročitajte o tome:
Eritropoetin je glikoproteinski hormon, točnije citokin, glavni regulator eritropoeze, koji potiče stvaranje eritrocita iz stanica kasnih prekursora i povećava iskorištavanje retikulocita koštane srži ovisno o unosu kisika. Sve dok oksigenacija tkiva nije narušena, koncentracija eritropoetina, kao i broj crvenih krvnih stanica u opticaju, ostaju konstantni. Proizvodnja eritropoetina regulirana je na razini transkripcije gena, a budući da je jedini fiziološki poticaj za povećanje broja stanica koje sintetiziraju eritropoetin hipoksija, niti proizvodnja niti metabolizam eritropoetina ne ovise o njegovoj koncentraciji u plazmi. Zdrava osoba ima približno 2,3*10^13 crvenih krvnih zrnaca u svom tijelu, s prosječnim životnim vijekom od 120 dana. Stoga se bazen eritrocita treba stalno obnavljati u tijelu brzinom od približno 2,3 stanice u sekundi. Sustav diferencijacije eritroidnih stanica treba strogo regulirati kako bi se održala konstantna razina cirkulirajućih eritrocita u normalnim uvjetima. Osim toga, ovaj sustav trebao bi biti vrlo osjetljiv na promjene u količini kisika u tijelu. Trenutno postoji mnogo dokaza da je ključni faktor koji osigurava kontrolu diferencijacije stanica eritroidnog raspona eritropoetin koji cirkulira u krvi.
Eritropoetin je iznimno aktivan hormon koji u tijelu djeluje u pikomolarnim koncentracijama. Male fluktuacije njegove koncentracije u krvi dovode do značajnih promjena u brzini eritropoeze, a normalni raspon njezinih koncentracija varira od 4 do 26 IU/l. Stoga, sve dok koncentracija hemoglobina ne bude niža od 105 g/l, koncentracija eritropoetina ne izlazi iz tog raspona i nemoguće je otkriti njezino povećanje (osim ako ne znate njegove početne vrijednosti). Eritrocitoza dovodi do potiskivanja proizvodnje eritropoetina mehanizmom negativne povratne sprege. To nije posljedica samo povećane isporuke kisika u tkiva zbog povećanog broja crvenih krvnih stanica u cirkulaciji, već i povećane viskoznosti krvi. Za sportaša to znači smanjenje proizvodnje vlastitog hormona tijekom uvođenja egzogenog i kršenje mehanizama regulacije proizvodnje eritrocita. Stoga, koristeći eritropoetin kao doping sredstvo u sportu, sportaš bi trebao razmisliti o budućnosti proizvodnje eritrocita u tijelu.
Doping testovi
Obično se eritropoetin nalazi u uzorcima urina ili krvi. Vjerojatnije je da će se otkriti krv nego urin. Poluvijek je 5-9 sati, tj. Vjerojatnost otkrivanja značajno se smanjuje nakon 2-3 dana.
Heparin se koristi kao sredstvo za maskiranje. Također se koristi injekcija proteaze u mjehur kroz kateter.
Fiziološka uloga eritropoetina
Dugo je vrijeme ostalo otvoreno pitanje stanica koje proizvode eritropoetin. To je prvenstveno posljedica nedostatka izravnih metoda identifikacije stanica koje sintetiziraju hormon. Identifikacija stanica provedena je neizravnim metodama, uključujući sposobnost tkivnih kultura da sintetiziraju proizvod in vitro. Vjerovalo se da su glavni kandidati za ulogu stanica koje proizvode EPO bile glomerne stanice i stanice proksimalnog dijela tubula. Kloniranje gena eritropoetina, kao i razvoj metoda hibridizacije in situ koje omogućuju izravnu identifikaciju onih stanica u kojima se odvija ekspresija određenih gena, promijenile su ideju o prirodi stanica koje sintetiziraju eritropoetin. In situ hibridizacija je pokazala da stanice u kojima se sintetizira mRNA eritropoetina nisu glomerularne ili cjevaste. Očigledno, glavno mjesto sinteze EPO -a u bubrezima su intersticijske stanice ili endotelne stanice kapilara. Kao što je već napomenuto, hipoksija je glavni faktor koji regulira proizvodnju EPO -a. U uvjetima hipoksije broj EPO-a koji cirkulira u plazmi povećava se približno 1000 puta i doseže 5-30 jedinica/ml. Brojni pokusi s izoliranim bubrezima pokazali su da sadrži senzore koji reagiraju na promjene koncentracije kisika.
Još 1987. J. Schuster i njegovi kolege istraživali su kinetiku proizvoda eritropoetina kao odgovor na hipoksiju. Pokazano je da se približno 1 sat nakon uspostave hipoksije povećava količina mRNA eritropoetina u bubregu, a mRNA se nastavlja akumulirati 4 sata. Kad se ukloni hipoksija, razina EPO mRNA brzo se smanjuje. Promjene u količini plazme i bubrežnog eritropoetina otkrivene eritropoetin-specifičnim antitijelima strogo su paralelne s promjenama količine mRNA s odgovarajućim razdobljem kašnjenja. Rezultati dobiveni u ovoj studiji ukazuju da se de novo proizvodnja EPO -a stimulira tijekom.
U S laboratoriju. Konry je 1989. istraživao proces indukcije sinteze EPO -a metodom hibridizacije in situ na presjecima tkiva bubrežne kortikalne tvari. Utvrđeno je da je pod anemijom proizvodnja EPO značajno povećana, iako je intenzitet hibridizacije s EPO mRNA u pojedinim stanicama ostao nepromijenjen. Pokazano je da je povećanje proizvodnje EPO povezano s povećanjem broja stanica koje sintetiziraju hormon. Kako se normalni hematokrit obnavlja, broj stanica koje sintetiziraju eritropoetin brzo se smanjuje, a kinetika promjene korelira s kinetikom smanjenja broja mRNA EPO i cirkulirajućeg hormona. Podaci histološke analize ukazuju na to da EPO sintetiziraju intersticijske stanice kortikalnog dijela bubrega.
Pokazano je da je 5 do 15% eritropoetina u plazmi odraslih osoba izvanstaničnog podrijetla. A ako je glavno mjesto sinteze eritropoetina u embrijima jetra, jetra je u odraslom tijelu također glavni organ koji proizvodi EPO, ali ekstrarenalno. Ovaj zaključak potvrđen je u nedavnim pokusima za otkrivanje mRNA EPO u različitim organima. Očigledno je da je promjena glavnog mjesta sinteze EPO -a tijekom ontogeneze genetski uvjetovan događaj.
Sintezu eritropoetina u tijelu posreduje značajan broj biokemijskih kofaktora i stimulansa. Pretpostavlja se da hipoksija dovodi do smanjenja razine kisika u specifičnim osjetnim stanicama bubrega, što uzrokuje povećanje proizvodnje prostaglandina u stanicama nodula. Pokazalo se da prostaglandini imaju važnu ulogu u poticanju proizvodnje eritropoetina. Inhibitori sinteze prostaglandina imaju snažan učinak na proizvodnju EPO -a u slučaju hipoksije. Glavni doprinos biosintezi prostaglandina u hipoksiji vjerojatno ima sustav ciklooksigenaze. Kod hipoksije (kao i pri uvođenju iona kobalta) dolazi do oslobađanja neutralnih proteaza i lizosomalnih hidrolaza u bubrezima koji, kako je pokazano, također potiču proizvodnju EPO. Čini se da je oslobađanje lizosomskih enzima povezano s povećanjem proizvodnje cGMF -a. Pokazano je da lizosomske enzime aktiviraju proteinske kinaze, koje pak aktivira cAMP.
U hipoksiji se opaža indukcija aktivnosti fosfolipaze A2, što dovodi do povećanja razine arahidonata, koji se uz sudjelovanje ciklooksigenaze pretvaraju u endoperokside. Uočeno je da je hipoksija optimalni uvjet za aktivnost ciklooksigenaze. Vjerojatno važnu ulogu u tim biokemijskim događajima ima sustav kalcija: ioni kalcija potiču aktivnost fosfolipaze A i stvaranje prostaglandina. Prostonoidi pak mogu inducirati aktivnost adenilat ciklaze i pokrenuti kaskadu biokemijskih događaja koji dovode do fosforilacije i aktivacije hidrolaze. Uloga hidrolaze i lanca koji na kraju dovodi do povećane sinteze EPO -a ostaje nejasna. Neki hormoni hipotalamus-hipofiznog sustava, hormoni štitnjače i neki steroidni hormoni također su aktivni u poticanju biosinteze EPO-a. Ioni kobalta specifični su induktor proizvodnje EPO -a, a njihov mehanizam djelovanja na sustav biosinteze EPO -a još nije jasan. Ovaj sustav privlačan je eksperimentalni model za proučavanje indukcije biosinteze EPO -a.
Molekula ljudskog eritropoetina, u kojoj ugljikohidratna komponenta čini 40-50 % molekulske mase (molekulska težina glikoproteina je 32-36*10^3 ujutro, a procijenjena molekularna težina proteinskog dijela je 18 399* 10^3 u), sastoji se od 193 aminokiselinska ostatka. EPO vrijednost izoelektrične točke je niska (pH 3,5-4,0), što je uzrokovano prisutnošću sialnih kiselina na terminalnim položajima lanaca ugljikohidrata eritropoetina. Izoelektrično fokusiranje EPO plazme u poliakrilamidnom gelu omogućuje otkrivanje nekoliko frakcija, identičnih po molekularnoj težini, ali različitih po veličini svojih izoelektričnih točaka, što svjedoči o heterogenosti u strukturi ugljikohidratnog dijela hormona. Otkidanje sijalinske kiseline tijekom liječenja neuraminidazom ili hidrolize kiseline dovodi do gubitka stabilnosti hormona in vivo, ali ne utječe na njegovu aktivnost in vitro. Na četiri mjesta ostaci glikozida vezani su za proteinski lanac, koji može predstavljati različite šećere, pa postoji nekoliko vrsta EPO -a s istom biološkom aktivnošću, ali malo različitim po svojim fizikalnim i kemijskim svojstvima.
Analiza sekvence aminokiselina eritropoetina čovjeka otkrila je tri potencijalna mjesta N-glikozilacije, koja uključuju konsenzusnu sekvencu Asn-X-Ser/Thr. U pokusima o tretmanu hormona s N-glikozidazom, koji je specifično otkinuo oligosaharidne lance povezane s ostatkom asparagina u N-glikozidnoj vezi, potvrđeno je da su u molekuli EPO pronađena tri mjesta N-glikozilacije. Kao rezultat pokusa s obradom hormona O-glikozidaze otkriveno je da on također sadrži oligosaharidne lance povezane s proteinskim dijelom pomoću O-glikozidnih veza.
Gen eritropoetina (gen: [07q21/EPO] eritropoetin) sastoji se od pet egzona i četiri introna. Gen kodira protein koji se sastoji od 193 aminokiselinska ostatka. Identificirane su četiri vrste rnA uključenih u interakciju s genom eritropoetina, od kojih su dvije zastupljene u ekstraktima nakon uvođenja kobalt klorida u znatno manjem broju kopija nego u normalnim ekstraktima. Ovi podaci ukazuju na prisutnost negativnih regulatornih čimbenika (vjerojatno, ribonukleoproteina) uključenih u regulaciju ekspresije gena eritropoetina. Pretpostavku negativne regulacije ekspresije gena EPO potvrdili su Semenza G. i kolege 1990. godine, koji su dobili seriju transgenih miševa koji kodiraju ljudski gen EPO i različite fragmente S-bočne regije. Analiza ekspresije gena u različitim transgenima omogućila je identifikaciju tri regulatorna elementa humanog gena za eritropoetin:
pozitivan regulatorni element potreban za indukciju ekspresije gena eritropoetina u jetri;
negativni regulatorni element;
regulatorni element potreban za inducibilnu ekspresiju gena u bubrezima.
Eksperimentalno je pokazano da postoje dva mjesta za inicijaciju gena za transkripciju eritropoetina koja nose mnoga mjesta inicijacije. U normalnim uvjetima, transkripcija se započinje s ograničenog broja web mjesta koja se nalaze na obje stranice. Kad je anemija indukcijski ili kobalt klorid, povećava se broj funkcionalnih mjesta započinjanja transkripcije na oba mjesta. U svim slučajevima proizvodnja eritropoetina ograničena je poteškoćama vezanim uz izolaciju i uzgoj stanica, nestabilnost proizvodnje hormona i, konačno, nisku koncentraciju u kulturnim tekućinama.
Temeljno drugačiji pristup dobivanju velikih količina visoko pročišćenog EPO -a bio je povezan s upotrebom metoda genetskog i staničnog inženjeringa. Pokušalo se stvoriti bakterijskog proizvođača eritropoetina. Protein proizveden u Escherichia coli prepoznat je po antitijelima protiv EPO -a i ima molekulsku masu koja približno odgovara deglikoziliranom humanom EPO -u. Poznato je da bakterijske stanice imaju sustav glikozilacije koji se bitno razlikuje od onog u eukariotskih stanica. Stoga je nemoguće dobiti ispravno glikozilirani protein u bakterijskim stanicama. U slučaju EPO -a, dobivanje ispravno glikoziliranog glikoproteina od temeljne je važnosti. Stoga je stvaranje proizvođača hormona na temelju bakterijskih stanica neispravno. Učinkovita proizvodnja biološki aktivnog eritropoetina in vitro i in vivo može se postići samo na temelju stanica viših životinja.
U proučavanju svojstava rekombinantnog EPO -a pokazalo se da prisutnost nepotpune ugljikohidratne komponente (molekulska masa eritropoetina sintetiziranog u ovom sustavu jednaka je 23*10^3 u) ne utječe na aktivnost hormona in vitro, ali značajno smanjuje njegovu aktivnost in vivo. Istodobno, potpuno odvajanje ugljikohidrata s glikozidazom dovodi do 80% gubitka biološke aktivnosti hormona u testu in vitro. Ti su podaci u suprotnosti s postojećim idejama da ugljikohidratna komponenta EPO -a nije strogo potrebna za njegovu aktivnost in vitro.
Povijesna bilješka
Godine 1989. provedena je detaljna analiza strukture rekombinantnog EPO dobivenog transfekcijom stanica iz jajnika kineskog hrčka u genom humanog EPO. Utvrđeno je da se u stanicama sintetiziraju dvije vrste EPO (zvane bi- i tetra-formi) koje se razlikuju po stupnju grananja lanaca ugljikohidrata vezanih s N. Bi-oblik EPO-a koji sadrži manje razgranatu ugljikohidratnu komponentu značajno se razlikuje po svojoj biološkoj aktivnosti od nativnog eritropoetina koji se koristi kao standard: biološka aktivnost bi-oblika EPO in vivo je 7 puta niža, a in vitro- 3 puta veći. Biološka aktivnost tetraobličkog EPO-a vrlo je bliska aktivnosti prirodnog EPO-a. Ovi podaci ukazuju na značajnu ulogu strukture sastava ugljikohidrata u biološkoj aktivnosti eritropoetina in vivo. Očito je veća in vitro aktivnost onih oblika eritropoetina koji sadrže nepotpunu komponentu ugljikohidrata povezana s olakšavanjem interakcija eritropoetina s receptorima. Istodobno, čini se da upravo komponenta ugljikohidrata osigurava stabilnost hormona u tijelu i, sukladno tome, visoku razinu biološke aktivnosti in vivo testova.
Sredinom osamdesetih godina prošlog stoljeća prvi rekombinantni eritropoetin dobiven je uvođenjem humanog EPO gena (lokaliziranog u ljudi na sedmom kromosomu u regiji 11q-12q) u stanice jajnika hrčaka. Rekombinantni humani p-EPO dobiven genetskim inženjeringom (rekombinacija) identičan je po sastavu aminokiselina prirodnom ljudskom EPO -u. Recorpone pruža fleksibilnu i isplativu metodu učinkovitog liječenja anemije u kombinaciji s visokim sigurnosnim profilom i izvrsnom podnošljivošću. Zahvaljujući uporabi rekormona, potreba za hemotransfuzijama, koje su danas najčešća metoda ispravljanja anemije, značajno je smanjena. Prema tome, prema brojnim istraživanjima, upotreba rekormona omogućuje vraćanje normalne razine hemoglobina i uklanja potrebu za zamjenskom hemotransfuzijom kod pacijenata oboljelih od anemije. Istodobno, dolazi do značajnog poboljšanja kvalitete života ovih pacijenata; rizik od infekcije, koji postoji tijekom korekcije anemije uz pomoć hemotransfuzije u liječenju virusnih zaraznih bolesti poput HIV -a i hepatitisa C, značajno se smanjuje. Recorpone je dostupan kao prikladan uređaj za primjenu i indikaciju lijeka (štrcaljka za olovke).
Istodobno, postoje neznatne razlike u sastavu glikozidnih ostataka, koje utječu na fizikalno -kemijska svojstva cijele molekule hormona. Tako su, na primjer, utvrđene određene razlike u raspodjeli električnog naboja za određene vrste eritropoetina. Eritropoetin proizvode različite farmaceutske tvrtke u pet vrsta: alfa, beta, retard (NESP i CERA), theta i omega.
Alfa EPO i beta EPO koriste se od 1988. S potkožnom injekcijom, njihova je bioraspoloživost oko 25%, maksimalna koncentracija u krvi je 12-18 sati, poluvrijeme je do 24 sata (s intravenoznom injekcijom-5- 6 sati). Eritropoetin retard (NESP i CERA) koristi se posljednjih nekoliko godina i učinkovitiji je od ostalih lijekova EPO. Danas se theta EPO smatra najučinkovitijim i najmanje alergenim, s najvećim stupnjem čistoće. To je zbog činjenice da se dobiva metodama genetskog inženjeringa u ljudskim stanicama (neki beskrupulozni sportaši i sportski liječnici vjeruju da je zbog toga ne može otkriti). Zapravo, theta EPO je samo 99% identičan onom kod ljudi. Omega-epo, koja se dobiva iz bubrega hrčka, najviše se razlikuje od drugih EPO lijekova u ljudi, pa ju je najlakše otkriti. Prodaje se samo u istočnoj Europi i Južnoj Americi.
Pripravci eritropoetina
Rekombinantni bioslični a-EPO-i različitih proizvođača, čak i oni odobreni od strane Odbora za lijekove za humanu uporabu (CHMP) Europske agencije za lijekove za humanu uporabu, mogu imati različita svojstva, čistoću i, što je najvažnije, različitu biološku aktivnost. Kad su analizirani različiti proizvođači eritropoetina, 5 od 12 proučavanih proizvoda pokazalo je značajna odstupanja u jakosti djelovanja između različitih serija, u tri uzorka - neprihvatljive razine bakterijskih endotoksina.
Druga studija bila je usporedba 11 EPO proizvoda (zaprimljenih od osam proizvođača) dostupnih na tržištima izvan EU-a u smislu sadržaja, jakosti i sastava izoforme aktivnog sastojka (eritropoetina). In vitro bioaktivnost bila je u rasponu od 71-226%, pri čemu 5 uzoraka nije zadovoljavalo specifikacije. Među odstupanjima u sastavu izoforme su: prisutnost jedne ili više dodatnih kiselih i/ili bazičnih izoformi, kao i promijenjeni količinski omjer različitih izoformi. Utvrđene su i međuserijske razlike; neki proizvodi nisu zadovoljavali vlastite specifikacije, tj. proizvođači nisu osigurali odgovarajuću kontrolu proizvodnih procesa. Količina aktivnog sastojka također nije uvijek bila u skladu s navedenom količinom. Takva odstupanja od deklariranih parametara mogu imati važan klinički značaj, jer mogu dovesti do predoziranja ili, obrnuto, do niže doze. Dostavljeni podaci jasno ukazuju na prijetnju korištenja rekombinantnih eritropoetina bez medicinskih indikacija.
Medicinske aplikacije
U medicinskoj praksi eritropoetin se koristi za liječenje anemije različite geneze, uključujući bolesnike s rakom s kroničnim zatajenjem bubrega. Budući da se, kao što je gore navedeno, endogeni eritropoetin stvara u bubrezima u tijelu, pacijenti s kroničnim zatajenjem bubrega uvijek pate od anemije. Osim toga, smanjenje koncentracije EPO -a u ljudskoj plazmi i posljedično broja crvenih krvnih zrnaca opaža se u sljedećim patološkim stanjima i bolestima:
sekundarna policitemija;
Neadekvatna stimulacija vlastitog EPO -a;
benigna bolest bubrega (hidronefroza);
opća hipoksija tkiva;
Poremećaj opskrbe krvlju bubrega
Smanjena koncentracija kisika u okolišu;
Kronična opstruktivna plućna bolest;
Kardiovaskularne bolesti (zdesna nalijevo);
anomalije u strukturi molekule hemoglobina (anemija srpastih stanica);
Učinci ugljikovih monoksida na tijelo, posljedica pušenja;
Arterioskleroza bubrežne arterije;
odbacivanje transplantata;
bubrežne aneurizme.
Prije pojave rekombinantnog eritropoetina, takvi su bolesnici redovito bili podvrgnuti hematransfuziji i cijele krvi i eritrocitne mase. Međutim, od 1989. godine takvi postupci više nisu potrebni jer su zamijenjeni pripravcima eritropoetina. U nekim slučajevima anemija drugog podrijetla također se uspješno liječi rekombinantnim EPO -om. Autologni darivatelji krvi koriste činjenicu da uvođenje rekombinantnog EPO -a izaziva dodatnu eritropoezu čak i na potpuno netaknutoj endogenoj razini EPO -a. Kao alternativa transfuziji eritrocitne mase, EPO terapija visokim dozama učinkovita je antianemična mjera kao popratna terapija u liječenju kroničnog poliartritisa, AIDS-a, nekih tumora, kao i u nizu kirurških intervencija. Geneza hipertenzije kao nuspojave terapijske uporabe rekombinantnog EPO još uvijek je nejasna. Kada se pacijentima provodi hemodijaliza, lijekovi eritropoetina obično se primjenjuju intravenozno. U nekim se slučajevima isti lijek može ubrizgati potkožno.
Povećanje broja crvenih krvnih stanica pod utjecajem eritropoetina, pak, dovodi do povećanja sadržaja kisika po jedinici volumena krvi, a posljedično do povećanja kapaciteta kisika u krvi i isporuke kisika u tkiva. U konačnici, povećava se izdržljivost tijela. Slični učinci postižu se tijekom vježbi u srednjim planinama, kada nedostatak kisika u zraku uzrokuje stanje hipoksije, što potiče proizvodnju endogenog EPO -a. Naravno, u usporedbi s primjenom rekombinantnog lijeka, hipoksični trening fiziološki je mehanizam regulacije eritropoeze i poboljšanja transportne funkcije kisika hemoglobina, što je svrha korištenja EPO -a kao doping sredstva.
Zbog učinka eritropoetina na kapacitet kisika i transport kisika u tkivima, ova tvar uzrokuje povećane performanse u sportu s dominantnom manifestacijom aerobne izdržljivosti. Ove sportske discipline uključuju sve vrste atletskog trčanja, počevši od 800 m, kao i sve vrste skijaških i biciklističkih utrka. Osim toga, publikacije o bodybuildingu nedavno su počele pokazivati da EPO može zamijeniti masovnu uporabu anaboličkih steroida. Epo lijekovi koriste se u kombinaciji sa stanazolom, inzulinom i somatotropinskim hormonom (HGH).
Pripravci eritropoetina su dobro podnošljiva farmakološka sredstva koja gotovo nemaju nuspojava. Međutim, predoziranje EPO -om i nekontrolirana uporaba mogu dovesti do povećanja viskoznosti krvi i posljedično do povećanja rizika od poremećaja cirkulacije krvi, sve do periferne vaskularne tromboze i plućne embolije, što obično dovodi do smrti. Rizik od ovih nuspojava EPO -a povećava se s treninzima u srednjim planinama, kao i s dehidracijom.
Međutim, postoje dokazi da dugotrajna uporaba pripravaka eritropoetina može biti opasna po zdravlje, a ponekad i po život. Konkretno, uporaba EPO -a povezana je s stalnim glavoboljama u sportaša zbog zgrušavanja krvi i poremećaja cirkulacije u mozgu. Osim toga, metabolizam željeza može biti narušen: potreba tijela za željezom povećava se kada postoji relativno mala zaliha željeza u jetri. Kad se unese egzogeno željezo, ono se počinje taložiti u jetri, pa se ciroza jetre povezana s viškom željeza očituje nakon 20-25 godina.
Eritropoetin u sportu
Povijest uporabe rekombinantnog eritropoetina u sportu (koji se u znanstvenoj literaturi obično koristi kao rHuEPO, r-HuEPO, rhu-EPO, rEPO) seže u 1977. godinu, kada je eritropoetin prvi put izoliran iz ljudskog urina u pročišćenom obliku. Uvođenje i kontrola eritropoetina u sport i natjecanje kao zabranjenog lijeka provedeno je u sljedećim fazama:
1985. - klonirao gen EPO;
1987. - rekombinantni eritropoetin postao je prvi put dostupan u Europi;
1987.-1990. - Nekoliko smrtnih slučajeva među nizozemskim i belgijskim biciklistima pripisuje se upotrebi EPO -a;
1988. - Međunarodna skijaška federacija uvrstila je eritropoetin na svoju listu dopinga;
1989. - FDA (Uprava za hranu i lijekove) - Vladina agencija koja kontrolira proizvodnju i distribuciju lijekova u zemlji dopušta proizvodnju rekombinantnog EPO -a;
1990. - MOK je zabranio uporabu eritropoetina;
1993.-1994. - IAAF, uz aktivno sudjelovanje profesorice M. Donike, uvodi postupke vađenja krvi na osam natjecanja Svjetskog kupa;
1997. - Međunarodna biciklistička unija i Međunarodna skijaška federacija odobrile su postupak uzorkovanja krvi prije početka natjecanja, postavljajući granice za hematokrit i hemoglobin. Prekoračenje ovih granica nije temelj za neprihvatljivost, namjerava se zaštititi tijelo sportaša od potencijalnih komplikacija povezanih s povišenim hemoglobinom i hematokritom;
1998. - Otkrivanje uporabe eritropoetina u sportu na biciklističkoj utrci Tour de France dobilo je opsežnu medijsku pokrivenost;
1999. - Pojačana su istraživanja o razvoju pouzdane metode otkrivanja EPO -a za Olimpijske igre u Sydneyu.
Budući da prirodni i rekombinantni eritropoetin imaju gotovo identičnu strukturu aminokiselina, rekombinantni eritropoetin je iznimno teško razlikovati od njegovog fiziološkog analoga.
Udisanje ksenona za inhalaciju aktivno se koristi za poticanje lučenja eritropoetina u Rusiji. Na Olimpijskim igrama u Sočiju 2014. mnogi su ruski sportaši dobili inhalaciju ksenona prije početka natjecanja. Ovu metodu je zabranila Antidoping agencija od svibnja 2014. godine.
Doping kontrola
Trenutni arsenal metoda za određivanje eritropoetina uključuje izravan i neizravan pristup. Izravna metoda temelji se na identifikaciji onih beznačajnih razlika koje su pronađene u proučavanju prirodnog endogenog eritropoetina i EPO -a dobivenog genetskim inženjeringom. Konkretno, neki su istraživači pokušali koristiti razlike u raspodjeli električnog naboja koje su utvrđene za dvije vrste molekula ELISA. Na temelju ovih razlika pokušano je razdvojiti dvije vrste molekula metodom kapilarne elektroforeze. Iako je to odvajanje u načelu moguće, zahtijeva velike količine urina (do 1 litre, što je razumljivo neprihvatljivo za praksu).
Prednost se daje neizravnim metodama koje zahtijevaju samo male količine uzoraka krvi ili urina. Primjeri neizravnih metoda za otkrivanje EPO -a su:
Odstupanja od normalnih razina u biookruženju uzorka. Ova činjenica znači da bi se utvrđeni višak razine EPO -a trebao razlikovati od fizioloških ili patoloških varijacija. Međutim, uporaba ovog kriterija moguća je samo ako je raspon varijacija dovoljno uzak u usporedbi s vrijednostima koje se otkriju nakon egzogene primjene lijeka. Ovo posljednje moguće je samo ako se krv koristi kao uzorak za doping test;
Registriranje biokemijskih parametara čija vrijednost ovisi o koncentraciji eritropoetina. Ovaj pristup može se temeljiti na mjerenju serumskog sadržaja topljivog receptora transferina (sTfR), čija se razina povećava nakon uvođenja rekombinantnog EPO. Međutim, slične promjene događaju se nakon treninga na srednjim planinama;
određivanje fibrina i produkata razgradnje fibrinogena u urinu nakon primjene EPO -a.
Trenutno je gotovo nemoguće pouzdano identificirati slučajeve egzogene injekcije eritropoetina u tijelo. Stoga se za kontrolu koriste fiziološki parametri krvi koji se detektiraju nakon uvođenja EPO -a. Tako Međunarodna biciklistička unija koristi kriterij najveće vrijednosti hematokrita (50% za muškarce). Međunarodna skijaška federacija utvrdila je najveće dopuštene vrijednosti hemoglobina (165 g/l za žene i 185 g/l za muškarce) i razine retikulocita od najviše 0,2%. Ako se te granice prekorače tijekom postupka kontrole prije natjecanja, dotični sportaš bit će suspendiran s natjecanja iz zdravstvenih razloga. Međutim, i hemoglobin i hematokrit pokazatelji su na koje utječu mnogi čimbenici. Posebno se oba ova pokazatelja mogu značajno promijeniti čak i nakon jedne sesije prosječne izdržljivosti volumena. Osim toga, ove pokazatelje karakterizira značajna individualna varijabilnost. Stoga pojedinačni višak od više od 50% vrijednosti hematokrita ne može dokazati zlouporabu eritropoetina u sportu.
Kako bi se poboljšala kontrola nad upotrebom eritropoetina kao doping sredstva, WADA je uvela modus operandi Aporttle Blood Passport. Krvna putovnica jedan je od WADA -inih razvoja koji je prvenstveno usmjeren na otkrivanje eritropoetina i njegovih analoga. Generira jedinstveni kompjuterizirani hematološki profil za svakog sportaša na temelju 30 različitih pokazatelja, prvo u onim sportovima gdje je potrebna izdržljivost. Deset zemalja, uključujući Švedsku, Norvešku, Kanadu i Njemačku, već se pridružilo uvođenju i poboljšanju programa certificiranja krvi. Ruska antidoping agencija odobrava ovu inicijativu, no bit će provedena nakon što se dovrše svi medicinski i pravni aspekti.
WADA preporučuje korištenje Sysmexa (Japan) ili podružnice ERMA -e za obavljanje testova na krvnoj karti sportaša. Ova marka najnovije generacije potpuno automatskih hematoloških analizatora osvojila je najveći indeks povjerenja u točnost krvne slike.
Tijekom intenzivnih treninga i profesionalnih sportskih aktivnosti potrebno je stalno provoditi hematološke analize kako bi se utvrdio broj eritrocita i njihovi parametri (volumen, zasićenost hemoglobinom), razina hemoglobina i hematokrita. Ne smije se dopustiti da se hematokrit podigne iznad 50% - to dovodi do zgušnjavanja krvi, što je pak ispunjeno pogoršanjem cirkulacije krvi u mišićima i unutarnjim organima, povećanim rizikom od tromboze (sklonost trombofiliji može se procijeniti markerom D-dimer). Osim toga, postoji potreba za potpunom kontrolom metabolizma željeza (koncentracija željeza u serumu, ukupni i nezasićeni kapacitet vezanja željeza, postotak zasićenja željezom, transferin, feritin, C-reaktivni protein) i određivanje razine folne kiseline i vitamina B12 u krv. Svi ti spojevi neophodni su za pravilnu eritropoezu i ne smiju se dopustiti nedostatku tijekom sportskih aktivnosti. Osim navedenih testova, potrebno je kontrolirati i razinu samog eritropoetina.
Gdje kupiti EPO?
Na našoj web stranici možete kupiti EPO s dostavom po cijelom svijetu. Bez obzira u kojoj zemlji živjeli, paket ćete dobiti bez problema na carini i bez rizika od gubitka novca. Za naručivanje ne morate posjetiti liječnika ili imati recept.
Na zalihama uvijek imamo EPO -e nekoliko vrsta i generacija:
Epoetin alfa ( Binocrit , Eprexa® , Eralfon , Epocrin, imenima PROCRIT)
Epoetin Beta ( Vero epoetin , Epostim , Erythropoietin Binnopharm , Recormon )
NESP ( Aranesp )
CERA ( Mirčera )
Koliko košta EPO?
Naše cijene EPO -a ovise o zemlji podrijetla lijeka, obliku proizvodnje (ampule/bočice/štrcaljke), kao i cijeni nabave.
Najniža cijena počinje od 30 USD za jednu bočicu od 2000 ME (pogodna za probnu narudžbu).
Za veleprodajne kupce na zahtjev možemo ponuditi skupne cijene.
EPO dostava
EPO isporučujemo u sve zemlje svijeta, uključujući i one sa strogim carinskim nadzorom. U mogućnosti smo jamčiti isporuku većine naših EPO proizvoda bez carinske kontrole. Ako živite u Australiji, Novom Zelandu, Njemačkoj, Švicarskoj, Austriji, Italiji ili Sjedinjenim Državama i već očajnički želite dobiti EPO, mi smo vaša jedina mogućnost.
Na vaš zahtjev možemo dogovoriti izravnu ili tranzitnu dostavu iz Europe (cijene i dostupni lijekovi dogovaraju se pojedinačno).