Rudens akcija!
Pērciet otro iepakojumuBinocrit 3000IUar 40% atlaidi!
Divi iepakojumi ar 6 šļircēm katrā par USD 400 (12 šļirces kopā 36 000 iu).
Akcija ir ierobežota līdz akcijas preču pieejamībai.
Pirms iegādāties EPO mūsu aptiekā, lūdzu, izlasiet par to:
Eritropoetīns ir glikoproteīnu hormons, precīzāk citokīns, galvenais eritropoēzes regulators, kas stimulē eritrocītu veidošanos no vēlīnām prekursoru šūnām un palielina kaulu smadzeņu retikulocītu ražu atkarībā no skābekļa uzņemšanas. Kamēr audu skābekļa daudzums netiek traucēts, eritropoetīna koncentrācija, kā arī cirkulējošo sarkano asins šūnu skaits paliek nemainīgs. Eritropoetīna ražošanu regulē gēnu transkripcijas līmenī, un, tā kā vienīgais fizioloģiskais stimuls palielināt eritropoetīnu sintezējošo šūnu skaitu ir hipoksija, ne eritropoetīna ražošana, ne metabolisms nav atkarīgs no tā koncentrācijas plazmā. Veselīga cilvēka ķermenī ir aptuveni 2,3*10^13 sarkano asins šūnu, un vidējais dzīves ilgums ir 120 dienas. Tāpēc eritrocītu kopums organismā pastāvīgi jāatjauno ar ātrumu aptuveni 2,3 šūnas sekundē. Eritroīdu šūnu diferenciācijas sistēma ir stingri jāregulē, lai normālos apstākļos uzturētu nemainīgu cirkulējošo eritrocītu līmeni. Turklāt šai sistēmai jābūt ļoti jutīgai pret skābekļa daudzuma izmaiņām organismā. Pašlaik ir daudz pierādījumu tam, ka galvenais faktors, kas nodrošina eritroīda diapazona šūnu diferenciācijas kontroli, ir eritropoetīns, kas cirkulē asinīs.
Eritropoetīns ir ārkārtīgi aktīvs hormons, kas organismā darbojas pikomolārās koncentrācijās. Nelielas tā koncentrācijas svārstības asinīs izraisa būtiskas izmaiņas eritropoēzes ātrumā, un normālais tā koncentrācijas diapazons svārstās no 4 līdz 26 SV/l. Tāpēc, kamēr hemoglobīna koncentrācija nav zemāka par 105 g/l, eritropoetīna koncentrācija nepārsniedz šo diapazonu un nav iespējams noteikt tā pieaugumu (ja vien jūs nezināt tā sākotnējās vērtības). Eritrocitoze noved pie eritropoetīna ražošanas nomākšanas ar negatīvas atgriezeniskās saites mehānismu. Tas ir saistīts ne tikai ar palielinātu skābekļa piegādi audiem sakarā ar cirkulējošo sarkano asins šūnu skaita palielināšanos, bet arī ar paaugstinātu asins viskozitāti. Sportistam tas nozīmē paša hormona ražošanas samazināšanos eksogēnu ieviešanas laikā un eritrocītu ražošanas regulēšanas mehānismu pārkāpumu. Tāpēc, lietojot eritropoetīnu kā dopinga līdzekli sportā, sportistam jāapsver eritrocītu ražošanas nākotne organismā.
Dopinga testi
Parasti eritropoetīns tiek konstatēts urīnā vai asins paraugos. Asinis tiek konstatētas biežāk nekā urīns. Pusperiods ir 5-9 stundas, ti, atklāšanas varbūtība ievērojami samazinās pēc 2-3 dienām.
Heparīnu izmanto kā maskējošu līdzekli. Tiek izmantota arī proteāzes injekcija urīnpūslī caur katetru.
Eritropoetīna fizioloģiskā loma
Ilgu laiku jautājums par šūnām, kas ražo eritropoetīnu, palika atklāts. Tas galvenokārt bija saistīts ar to, ka trūka tiešu hormonu sintezējošo šūnu identifikācijas metožu. Šūnu identifikācija tika veikta ar netiešām metodēm, ieskaitot audu kultūru spēju sintezēt produktu in vitro. Tika uzskatīts, ka galvenie kandidāti EPO ražojošo šūnu lomai bija glomēru šūnas un kanāliņu proksimālās daļas šūnas. Eritropoetīna gēna klonēšana, kā arī in situ hibridizācijas metožu izstrāde, kas ļauj tieši identificēt tās šūnas, kurās notiek noteiktu gēnu ekspresija, mainīja priekšstatu par eritropoetīnu sintezējošo šūnu dabu. In situ hibridizācija ir parādījusi, ka šūnas, kurās tiek sintezēts eritropoetīna mRNS, nav glomerulāras vai cauruļveida. Acīmredzot galvenā EPO sintēzes vieta nierēs ir intersticiālās šūnas vai kapilārās endotēlija šūnas. Kā jau minēts, hipoksija ir galvenais faktors, kas regulē EPO ražošanu. Hipoksijas apstākļos cirkulējošā EPO skaits plazmā palielinās aptuveni 1000 reizes un sasniedz 5–30 vienības/ml. Daudzi eksperimenti ar izolētām nierēm ir parādījuši, ka tajā ir sensori, kas reaģē uz skābekļa koncentrācijas izmaiņām.
Jau 1987. gadā J. Šusters un viņa kolēģi pētīja eritropoetīna produktu kinētiku, reaģējot uz hipoksiju. Tika pierādīts, ka apmēram 1 stundu pēc hipoksijas rašanās eritropoetīna mRNS daudzums nierēs palielinās un mRNS turpina uzkrāties 4 stundas. Kad hipoksija tiek noņemta, EPO mRNS līmenis strauji samazinās. Izmaiņas plazmas un nieru eritropoetīna daudzumā, ko nosaka eritropoetīnam specifiskas antivielas, ir stingri paralēlas mRNS daudzuma izmaiņām ar atbilstošu nobīdes periodu. Šajā pētījumā iegūtie rezultāti liecina, ka laikā tiek stimulēta EPO ražošana de novo.
S laboratorijā. Konijs 1989. gadā pētīja EPO sintēzes indukcijas procesu, izmantojot hibridizācijas metodi in situ uz nieru garozas vielas audu sekcijām. Tika konstatēts, ka anēmijas gadījumā EPO ražošana tika ievērojami palielināta, lai gan hibridizācijas intensitāte ar EPO mRNS atsevišķās šūnās palika nemainīga. Ir pierādīts, ka EPO ražošanas pieaugums ir saistīts ar hormonu sintezējošo šūnu skaita palielināšanos. Atjaunojot normālu hematokrītu, eritropoetīnu sintezējošo šūnu skaits strauji samazinās, un izmaiņu kinētika korelē ar mRNS EPO un cirkulējošā hormona skaita samazināšanās kinētiku. Histoloģiskās analīzes dati liecina, ka EPO sintezē nieru garozas daļas intersticiālās šūnas.
Ir pierādīts, ka 5 līdz 15% plazmas eritropoetīna pieaugušajiem ir ārpusšūnu izcelsme. Un, ja galvenā eritropoetīna sintēzes vieta embrijos ir aknas, aknas pieauguša cilvēka ķermenī ir arī galvenais orgāns, kas ražo EPO, bet ārpusdzemdes. Šis secinājums ir apstiprināts nesenajos eksperimentos, lai atklātu mRNS EPO dažādos orgānos. Acīmredzot EPO sintēzes galvenās vietas maiņa ontoģenēzes laikā ir ģenētiski noteikts notikums.
Eritropoetīna sintēzi organismā nodrošina ievērojams skaits bioķīmisko kofaktoru un stimulantu. Tiek pieņemts, ka hipoksija noved pie skābekļa līmeņa pazemināšanās īpašās nieru maņu šūnās, kas izraisa prostaglandīnu ražošanas palielināšanos mezgliņu šūnās. Ir pierādīts, ka prostaglandīniem ir svarīga loma eritropoetīna ražošanas stimulēšanā. Prostaglandīnu sintēzes inhibitoriem ir milzīga ietekme uz EPO ražošanu hipoksijas gadījumā. Galveno ieguldījumu prostaglandīnu biosintēzē hipoksijas gadījumā, iespējams, sniedz ciklooksigenāzes sistēma. Pie hipoksijas (un arī ieviešot kobalta jonus) nierēs izdalās neitrālas proteāzes un lizosomu hidrolāzes, kas, kā pierādīts, arī stimulē EPO veidošanos. Lizosomu enzīmu izdalīšanās, šķiet, ir saistīta ar cGMF ražošanas palielināšanos. Ir parādīts, ka lizosomu fermentus aktivizē proteīnu kināzes, kuras savukārt aktivizē cAMP.
Hipoksijas gadījumā tiek novērota fosfolipāzes A2 aktivitātes indukcija, kā rezultātā palielinās arahidonātu līmenis, kas, piedaloties ciklooksigenāzei, pārvēršas par endoperoksīdiem. Ir atzīmēts, ka hipoksija ir optimālais ciklooksigenāzes aktivitātes nosacījums. Iespējams, svarīga loma šajos bioķīmiskajos notikumos ir kalcija sistēmai: kalcija joni stimulē fosfolipāzes A aktivitāti un prostaglandīnu veidošanos. Prostonoīdi savukārt var izraisīt adenilāta ciklāzes aktivitāti un izraisīt bioķīmisko notikumu kaskādi, kas noved pie fosforilēšanās un hidrolāzes aktivācijas. Hidrolāzes un ķēdes loma, kas galu galā izraisa palielinātu EPO sintēzi, joprojām nav skaidra. Daži hipotalāma-hipofīzes sistēmas hormoni, vairogdziedzera hormoni un daži steroīdu hormoni arī aktīvi stimulē EPO biosintēzi. Kobalta joni ir īpašs EPO ražošanas induktors, un to darbības mehānisms uz EPO biosintēzes sistēmu vēl nav skaidrs. Šī sistēma ir pievilcīgs eksperimentāls modelis EPO biosintēzes indukcijas izpētei.
Cilvēka eritropoetīna molekula, kurā ogļhidrātu sastāvdaļa veido 40-50 % no molekulmasas (glikoproteīna molekulmasa ir 32-36*10^3 am, un proteīna daļas paredzamā molekulmasa ir 18 399* 10^3 u), sastāv no 193 aminoskābju atlikumiem. EPO izoelektriskā punkta vērtība ir zema (pH 3,5–4,0), ko izraisa sialskābes klātbūtne eritropoetīna ogļhidrātu ķēžu gala pozīcijās. Plazmas EPO izoelektriskā fokusēšana poliakrilamīda želejā ļauj atklāt vairākas frakcijas, kas ir identiskas molekulmasai, bet atšķiras pēc to izoelektrisko punktu lieluma, kas liecina par hormona ogļhidrātu daļas struktūras neviendabīgumu. Sialskābes atdalīšana ārstēšanas laikā ar neuraminidāzi vai skābes hidrolīze noved pie hormonu stabilitātes zuduma in vivo, bet neietekmē tās aktivitāti in vitro. Četrās vietās proteīnu ķēdei ir pievienoti glikozīdu atlikumi, kas var attēlot dažādus cukurus, tāpēc ir vairākas EPO šķirnes ar vienādu bioloģisko aktivitāti, bet nedaudz atšķiras pēc to fizikālajām un ķīmiskajām īpašībām.
Cilvēka eritropoetīna aminoskābju secības analīze atklāja trīs iespējamās N-glikozilācijas vietas, kas ietver Asn-X-Ser/Thr vienprātības secību. Eksperimentos par hormona apstrādi ar N-glikozidāzi, kas īpaši nošķēla oligosaharīdu ķēdes, kas saistītas ar N-glikozīdu saites asparagīna atlikumu, tika apstiprināts, ka EPO molekulā tika atrastas trīs N-glikozilācijas vietas. Eksperimentu rezultātā par hormona O-glikozidāzes apstrādi tika konstatēts, ka tas satur arī oligosaharīdu ķēdes, kas saistītas ar proteīna daļu, izmantojot O-glikozīdu saites.
Eritropoetīna gēns (gēns: [07q21/EPO] eritropoetīns) sastāv no pieciem eksoniem un četriem introniem. Gēns kodē proteīnu, kas sastāv no 193 aminoskābju atlikumiem. Ir identificēti četri rnA veidi, kas iesaistīti mijiedarbībā ar eritropoetīna gēnu, no kuriem divi ir attēloti ekstraktos pēc kobalta hlorīda ievadīšanas daudz mazākā eksemplāru skaitā nekā parastajos ekstraktos. Šie dati norāda uz negatīvu regulējošo faktoru (iespējams, ribonukleoproteīnu) klātbūtni, kas iesaistīti eritropoetīna gēna ekspresijas regulēšanā. Pieņēmumu par EPO gēnu ekspresijas negatīvo regulējumu 1990. gadā apstiprināja Semenza G. un viņa kolēģi, kuri ieguva virkni transgēnu peļu, kas kodē cilvēka EPO gēnu un dažādus S blakus esošā reģiona fragmentus. Gēnu ekspresijas analīze dažādos transgēnos ļāva identificēt trīs cilvēka eritropoetīna gēna regulējošos elementus:
pozitīvs regulējošs elements, kas nepieciešams eritropoetīna gēna ekspresijas indukcijai aknās;
negatīvs regulējošais elements;
regulējošais elements, kas nepieciešams gēna inducējamai ekspresijai nierēs.
Eksperimentāli ir pierādīts, ka eritropoetīna transkripcijas gēna ierosināšanai ir divas vietas, kurās ir daudzas iniciācijas vietas. Normālos apstākļos transkripcija tiek uzsākta no ierobežota skaita vietņu, kas atrodas abās vietās. Ja anēmija ir indukcija vai ārstēšana ar kobalta hlorīdu, funkcionējošo transkripcijas uzsākšanas vietu skaits abās vietās palielinās. Visos gadījumos eritropoetīna ražošanu ierobežo grūtības, kas saistītas ar šūnu izolāciju un audzēšanu, hormonu ražošanas nestabilitāti un, visbeidzot, zemo koncentrāciju kultūras šķidrumos.
Būtiski atšķirīga pieeja liela daudzuma ļoti attīrīta EPO iegūšanai bija saistīta ar ģenētiskās un šūnu inženierijas metožu izmantošanu. Tika mēģināts izveidot baktēriju eritropoetīna ražotāju. Escherichia coli ražoto proteīnu atpazīst antivielas pret EPO, un tā molekulmasa ir aptuveni tāda pati kā cilvēka deglikozilētā EPO. Ir zināms, ka baktēriju šūnām ir glikozilācijas sistēma, kas būtiski atšķiras no eikariotu šūnām. Tāpēc baktēriju šūnās nav iespējams iegūt pareizi glikozilētu proteīnu. EPO gadījumā būtiska nozīme ir pareizi glikozilēta glikoproteīna iegūšanai. Tāpēc hormonu ražotāja izveide, pamatojoties uz baktēriju šūnām, nav lietderīga. Efektīvu bioloģiski aktīva in vitro un in vivo eritropoetīna ražošanu var iegūt, tikai pamatojoties uz augstāku dzīvnieku šūnām.
Pētot rekombinantā EPO īpašības, tika pierādīts, ka nepilnīgas ogļhidrātu sastāvdaļas klātbūtne (šajā sistēmā sintezētā eritropoetīna molekulmasa ir vienāda ar 23*10^3 u) neietekmē hormona aktivitāti in vitro, bet ievērojami samazina tā aktivitāti in vivo. Tajā pašā laikā pilnīga ogļhidrātu atdalīšanās ar glikozidāzi izraisa 80% hormona bioloģiskās aktivitātes zudumu testā in vitro. Šie dati ir pretrunā esošajām idejām, ka EPO ogļhidrātu sastāvdaļa nav absolūti nepieciešama tās darbībai in vitro.
Vēsturiska piezīme
1989. gadā tika veikta sīka rekombinantā EPO struktūras analīze, kas iegūta, transfekējot šūnas no ķīniešu kāmja olnīcas cilvēka EPO genomā. Ir konstatēts, ka šūnās tiek sintezēti divu veidu EPO (saukti par bi- un tetra-formām), kas atšķiras ar N saistīto ogļhidrātu ķēžu sazarošanās pakāpi. EPO bi-forma, kas satur mazāk sazarotu ogļhidrātu komponentu, pēc bioloģiskās aktivitātes būtiski atšķiras no dabiskā eritropoetīna, ko izmanto kā standartu: EPO bi-formas bioloģiskā aktivitāte in vivo ir 7 reizes zemāka, bet in vitro- 3 reizes augstāks. Tetra formas EPO bioloģiskā aktivitāte ir ļoti tuvu dabiskajam EPO. Šie dati norāda uz ogļhidrātu komponenta struktūras nozīmīgo lomu eritropoetīna bioloģiskajā aktivitātē in vivo. Acīmredzot šo eritropoetīna formu, kas satur nepilnīgu ogļhidrātu komponentu, augstāka in vitro aktivitāte ir saistīta ar eritropoetīna mijiedarbības veicināšanu ar receptoriem. Tajā pašā laikā šķiet, ka tieši ogļhidrātu sastāvdaļa nodrošina hormona stabilitāti organismā un attiecīgi augstu bioloģiskās aktivitātes līmeni in vivo testos.
Līdz astoņdesmito gadu vidum pirmo rekombinanto eritropoetīnu ieguva, kāmja olnīcu šūnās ieviešot cilvēka EPO gēnu (kas lokalizēts cilvēkiem septītajā hromosomā 11q-12q reģionā). Rekombinantā cilvēka p-EPO gēnu inženierijas (rekombinācijas) rezultātā iegūtais aminoskābju sastāvs ir identisks cilvēka dabiskajam EPO. Recorpone nodrošina elastīgu un rentablu efektīvas anēmijas ārstēšanas metodi apvienojumā ar augstu drošības profilu un lielisku panesamību. Pateicoties recormone izmantošanai, ievērojami samazinās nepieciešamība pēc hemotransfūzijām, kas mūsdienās ir visizplatītākā anēmijas korekcijas metode. Tādējādi, saskaņā ar daudziem pētījumiem, recormone lietošana ļauj atjaunot normālu hemoglobīna līmeni un novērst nepieciešamību pēc hemotransfūzijas vēža slimniekiem, kuri cieš no anēmijas. Tajā pašā laikā ievērojami uzlabojas šo pacientu dzīves kvalitāte; ir ievērojami samazināts infekcijas risks, kas pastāv anēmijas korekcijas laikā ar hemotransfūziju palīdzību vīrusu infekcijas slimību, piemēram, HIV un C hepatīta, ārstēšanā. Recorpone ir pieejams kā ērta ierīce zāļu ievadīšanai un norādīšanai (pildspalvveida šļirce).
Tajā pašā laikā glikozīdu atlieku sastāvā ir nenozīmīgas atšķirības, kas ietekmē visas hormona molekulas fizikāli ķīmiskās īpašības. Tā, piemēram, ir konstatētas noteiktas atšķirības elektriskā lādiņa sadalījumā noteiktiem eritropoetīna veidiem. Eritropoetīnu ražo dažādi farmācijas uzņēmumi piecos veidos: alfa, beta, retard (NESP un CERA), teta un omega.
Alfa EPO un beta EPO tiek izmantoti kopš 1988. gada. Ar subkutānu injekciju to biopieejamība ir aptuveni 25%, maksimālā koncentrācija asinīs ir 12-18 stundas, eliminācijas pusperiods ir līdz 24 stundām (ar intravenozu injekciju-5- 6 stundas). Eritropoetīna palēninātājs (NESP un CERA) ir lietots pēdējos gados un ir efektīvāks nekā citas EPO zāles. Mūsdienās teta EPO tiek uzskatīts par visefektīvāko un vismazāk alerģiju izraisošo, ar visaugstāko tīrības pakāpi. Tas ir saistīts ar faktu, ka to iegūst ar gēnu inženierijas metodēm cilvēka šūnās (daži negodīgi sportisti un sporta ārsti uzskata, ka tas padara to nenosakāmu). Faktiski teta EPO ir tikai par 99% identisks cilvēkiem. Omega-epo, ko iegūst no kāmja nierēm, visvairāk atšķiras no citām EPO zālēm cilvēkiem, tāpēc to ir visvieglāk noteikt. Pārdots tikai Austrumeiropā un Dienvidamerikā.
Eritropoetīna preparāti
Dažādu ražotāju, pat tiem, kurus apstiprinājusi Eiropas Cilvēkiem paredzēto zāļu aģentūras Cilvēkiem paredzēto zāļu komiteja (CHMP), kombinētiem bioloģiski līdzīgiem a-EPO var būt atšķirīgas īpašības, tīrība un, pats galvenais, atšķirīga bioloģiskā aktivitāte. Analizējot dažādus eritropoetīna ražotājus, 5 no 12 pētītajiem produktiem konstatēja būtiskas atšķirības iedarbības stiprumā starp dažādām sērijām, trīs paraugos - nepieņemami baktēriju endotoksīnu līmeņi.
Vēl viens pētījums bija 11 ārpuskopienas tirgos pieejamo EPO produktu (saņemti no astoņiem ražotājiem) salīdzinājums pēc aktīvās sastāvdaļas (eritropoetīna) satura, stipruma un izoformas sastāva. In vitro bioaktivitāte svārstījās no 71 līdz 226%, pieci paraugi neatbilst specifikācijām. Starp izoforma sastāva novirzēm ir: vienas vai vairāku papildu skābju un/vai bāzes izoformu klātbūtne, kā arī mainīta dažādu izoformu kvantitatīvā attiecība. Tika konstatētas arī sēriju atšķirības; daži produkti neatbilda viņu specifikācijām, ti, ražotāji nenodrošināja adekvātu ražošanas procesu kontroli. Arī aktīvās sastāvdaļas daudzums ne vienmēr atbilda norādītajam daudzumam. Šādām novirzēm no deklarētajiem parametriem var būt svarīga klīniska nozīme, jo tās var izraisīt pārdozēšanu vai, gluži pretēji, mazāku devu. Sniegtie dati skaidri norāda uz draudiem izmantot rekombinantus eritropoetīnus bez medicīniskas indikācijas.
Medicīnas pielietojumi
Medicīnas praksē eritropoetīnu lieto dažādas izcelsmes anēmijas ārstēšanai, tostarp vēža slimniekiem ar hronisku nieru mazspēju. Tā kā, kā minēts iepriekš, organisma nierēs veidojas endogēns eritropoetīns, pacienti ar hronisku nieru mazspēju vienmēr cieš no anēmijas. Turklāt EPO koncentrācijas samazināšanās cilvēka plazmā un līdz ar to arī sarkano asins šūnu skaita samazināšanās tiek novērota šādos patoloģiskos apstākļos un slimībās:
sekundārā policitēmija;
Nepietiekama paša EPO stimulēšana;
labdabīga nieru slimība (hidronefroze);
vispārēja audu hipoksija;
Asins piegādes traucējumi nierēs
Samazināta skābekļa koncentrācija vidē;
Hroniska obstruktīva plaušu slimība;
Sirds un asinsvadu slimības (no labās uz kreiso);
anomālijas hemoglobīna molekulas struktūrā (sirpjveida šūnu anēmija);
Smēķēšanas ietekme uz oglekļa monoksīdu ķermeni;
Nieru artēriju ateroskleroze;
transplantāta noraidīšana;
nieru aneirismas.
Pirms rekombinantā eritropoetīna parādīšanās šādi pacienti tika regulāri pakļauti gan pilnasiņu, gan eritrocītu masas asins pārliešanai. Tomēr kopš 1989. gada šādas procedūras vairs nav vajadzīgas, jo tās ir aizstātas ar eritropoetīna preparātiem. Dažos gadījumos citas izcelsmes anēmiju veiksmīgi ārstē arī ar rekombinanto EPO. Autologie asins donori izmanto faktu, ka rekombinantā EPO ieviešana izraisa papildu eritropoēzi pat pilnīgi neskartā endogēnā EPO līmenī. Kā alternatīva eritrocītu masas pārliešanai EPO terapija lielās devās ir efektīvs antianēmisks līdzeklis kā pavadoša terapija hroniska poliartrīta, AIDS, dažu audzēju ārstēšanā, kā arī vairākās ķirurģiskās iejaukšanās reizēs. Hipertensijas ģenēze kā rekombinantā EPO terapeitiskās lietošanas blakusparādība joprojām ir neskaidra. Ja pacientiem tiek veikta hemodialīze, eritropoetīna zāles parasti ievada intravenozi. Dažos gadījumos tās pašas zāles var injicēt subkutāni.
Sarkano asins šūnu skaita palielināšanās eritropoetīna ietekmē savukārt palielina skābekļa saturu uz asins tilpuma vienību un līdz ar to palielina skābekļa daudzumu asinīs un piegādā skābekli audos. Galu galā palielinās ķermeņa izturība. Līdzīgi efekti tiek sasniegti treniņu laikā vidējos kalnos, kad skābekļa trūkums gaisā izraisa hipoksijas stāvokli, kas stimulē endogēno EPO ražošanu. Protams, salīdzinot ar rekombinanto zāļu lietošanu, hipoksiskā apmācība ir fizioloģisks mehānisms eritropoēzes regulēšanai un hemoglobīna skābekļa transportēšanas funkcijas uzlabošanai, kas ir mērķis, izmantojot EPO kā dopinga līdzekli.
Sakarā ar eritropoetīna ietekmi uz skābekļa ietilpību un skābekļa transportēšanu audos, šī viela izraisa paaugstinātu sniegumu sportā ar dominējošu aerobās izturības izpausmi. Šajās sporta disciplīnās ietilpst visa veida sporta skriešana, sākot no 800 m, kā arī visa veida slēpošanas un riteņbraukšanas sacensības. Turklāt kultūrisma publikācijas nesen sāka parādīt, ka EPO var aizstāt masveida anabolisko steroīdu lietošanu. Epo zāles lieto kombinācijā ar stanazolu, insulīnu un somatotropīna hormonu (HGH).
Eritropoetīna preparāti ir labi panesami farmakoloģiski līdzekļi, kuriem gandrīz nav blakusparādību. Tomēr EPO pārdozēšana un nekontrolēta lietošana var palielināt asins viskozitāti un līdz ar to palielināt asinsrites traucējumu risku, līdz pat perifēro asinsvadu trombozei un plaušu embolijai, kas parasti izraisa nāvi. Šo EPO blakusparādību risks palielinās, trenējoties vidējos kalnos, kā arī ar dehidratāciju.
Tomēr ir pierādījumi, ka eritropoetīna preparātu ilgstoša lietošana var būt bīstama veselībai un dažreiz dzīvībai. Jo īpaši EPO lietošana ir saistīta ar pastāvīgām galvassāpēm sportistiem asins recēšanas un asinsrites traucējumu dēļ smadzenēs. Turklāt var tikt traucēta dzelzs vielmaiņa: organisma nepieciešamība pēc dzelzs palielinās, ja aknās ir salīdzinoši neliels dzelzs krājums. Ievadot eksogēnu dzelzi, tas sāk nogulsnēties aknās, tā ka aknu ciroze, kas saistīta ar dzelzs pārpalikumu, izpaužas pēc 20-25 gadiem.
Eritropoetīns sportā
Rekombinantā eritropoetīna izmantošanas vēsture sportā (zinātniskajā literatūrā parasti izmantota kā rHuEPO, r-HuEPO, rhu-EPO, rEPO) aizsākās 1977. gadā, kad eritropoetīns pirmo reizi tika izolēts no cilvēka urīna tā attīrītā veidā. Eritropoetīna ieviešana un kontrole sportā un sacensībās kā aizliegta narkotika tika veikta šādos posmos:
1985. gads - klonēja EPO gēnu;
1987. gads - Eiropā pirmo reizi kļuva pieejams rekombinants eritropoetīns;
1987.-1990. - vairāki Nīderlandes un Beļģijas riteņbraucēju nāves gadījumi ir saistīti ar EPO izmantošanu;
1988. gads - Starptautiskā slēpošanas federācija savā dopinga sarakstā iekļauj eritropoetīnu;
1989 - FDA (Pārtikas un zāļu pārvalde) - valdības aģentūra, kas kontrolē narkotiku ražošanu un izplatīšanu valstī, atļauj ražot rekombinanto EPO;
1990. gads - SOK aizliedz lietot eritropoetīnu;
1993.-1994. - IAAF, aktīvi piedaloties profesoram M. Donikai, astoņās Pasaules kausa sacensībās ievieš asins savākšanas procedūras;
1997. gads - Starptautiskā riteņbraukšanas savienība un Starptautiskā slēpošanas federācija pirms sacensību sākuma apstiprina asins paraugu ņemšanas procedūru, nosakot hematokrīta un hemoglobīna robežas. Lai gan šo robežu pārsniegšana nav pamats neatbilstībai, tas ir paredzēts, lai aizsargātu sportista ķermeni no iespējamām komplikācijām, kas saistītas ar paaugstinātu hemoglobīna un hematokrīta līmeni;
1998. gads - Plaša plašsaziņas līdzekļu informācija tika atklāta par eritropoetīna izmantošanu sportā Tour de France velobraucienā;
1999. gads - Pastiprināti pētījumi par uzticamas EPO noteikšanas metodes izstrādi Olimpiskajām spēlēm Sidnejā.
Tā kā dabiskajam un rekombinantam eritropoetīnam ir gandrīz identiska aminoskābju struktūra, rekombinanto eritropoetīnu ir ārkārtīgi grūti atšķirt no tā fizioloģiskā analoga.
Ksenona ieelpošanas ieelpošana Krievijā tiek aktīvi izmantota eritropoetīna sekrēcijas stimulēšanai. 2014. gada Soču olimpiskajās spēlēs daudzi Krievijas sportisti pirms sacensību sākuma saņēma ksenona inhalācijas. Kopš 2014. gada maija Antidopinga aģentūra ir aizliegusi šo metodi.
Dopinga kontrole
Pašreizējais eritropoetīna noteikšanas metožu arsenāls ietver tiešas un netiešas pieejas. Tiešā metode ir balstīta uz to nenozīmīgo atšķirību identificēšanu, kas konstatētas dabiskā endogēnā eritropoetīna un EPO pētījumā, kas iegūts ar gēnu inženieriju. Jo īpaši daži pētnieki ir mēģinājuši izmantot atšķirības elektriskā lādiņa sadalījumā, kas konstatētas divu veidu ELISA molekulām. Pamatojoties uz šīm atšķirībām, tika mēģināts atdalīt divu veidu molekulas, izmantojot kapilārās elektroforēzes metodi. Lai gan šī atdalīšana principā ir iespējama, ir nepieciešams liels urīna daudzums (līdz 1 litram, kas praksē ir saprotami nepieņemami).
Priekšroka tiek dota netiešām metodēm, kurām nepieciešami tikai nelieli asins vai urīna paraugi. Netiešu metožu piemēri EPO noteikšanai ir šādi:
Atkāpes no parastā līmeņa parauga bioloģiskajā vidē. Šis fakts nozīmē, ka konstatētajam EPO līmeņa pārsniegumam vajadzētu atšķirties no fizioloģiskām vai patoloģiskām izmaiņām. Tomēr šī kritērija izmantošana ir iespējama tikai tad, ja variāciju diapazons ir pietiekami šaurs salīdzinājumā ar vērtībām, kas tiek konstatētas pēc zāļu eksogēnas ievadīšanas. Pēdējais ir iespējams tikai tad, ja izmanto asinis kā paraugu dopinga pārbaudei;
Bioķīmisko parametru reģistrācija, kuru vērtība ir atkarīga no eritropoetīna koncentrācijas. Šīs pieejas pamatā var būt seruma satura mērīšana šķīstošā transferīna receptorā (sTfR), kura līmenis palielinās pēc rekombinantā EPO ieviešanas. Tomēr līdzīgas izmaiņas notiek pēc treniņa vidējos kalnos;
fibrīna un fibrinogēna sadalīšanās produktu noteikšana urīnā pēc EPO ievadīšanas.
Pašlaik ir gandrīz neiespējami ticami noteikt gadījumus, kad ķermenī tiek ievadīta eksogēna eritropoetīna injekcija. Tāpēc kontrolei tiek izmantotas izmaiņas asins fizioloģiskajos parametros, kas tiek konstatētas pēc EPO ieviešanas. Tādējādi Starptautiskā riteņbraukšanas savienība izmanto maksimālās hematokrīta vērtības kritēriju (vīriešiem - 50%). Starptautiskā slēpošanas federācija ir noteikusi maksimālās pieļaujamās hemoglobīna vērtības (165 g/l sievietēm un 185 g/l vīriešiem) un retikulocītu līmeni ne vairāk kā 0,2%. Ja šīs robežas tiek pārsniegtas pirms sacensību kontroles procedūras, attiecīgais sportists tiks izslēgts no sacensībām veselības apsvērumu dēļ. Tomēr gan hemoglobīns, gan hematokrīts ir rādītāji, kurus ietekmē daudzi faktori. Jo īpaši abi šie rādītāji var būtiski mainīties pat pēc vienas vidējas apjoma izturības sesijas. Turklāt šos rādītājus raksturo ievērojama individuālā mainība. Tāpēc vienreizējs pārsniegums, kas pārsniedz 50% no hematokrīta vērtības, nevar pierādīt eritropoetīna ļaunprātīgu izmantošanu sportā.
Lai uzlabotu kontroli pār eritropoetīna lietošanu kā dopinga līdzekli, WADA ir ieviesusi sportista asins pases režīmu. Asins pase ir viens no WADA sasniegumiem, kura galvenais mērķis ir eritropoetīna un tā analogu noteikšana. Tas ģenerē vienu datorizētu hematoloģijas profilu katram sportistam, pamatojoties uz 30 dažādiem rādītājiem, vispirms tajos sporta veidos, kur nepieciešama izturība. Asins sertifikācijas programmas ieviešanai un uzlabošanai jau pievienojušās desmit valstis, tostarp Zviedrija, Norvēģija, Kanāda un Vācija. Krievijas Antidopinga aģentūra apstiprina šo iniciatīvu, taču tā tiks īstenota pēc visu medicīnisko un juridisko aspektu pabeigšanas.
WADA iesaka izmantot Sysmex (Japāna) vai ERMA meitasuzņēmumu, lai veiktu testus par sportista asins lapu. Šis jaunākās paaudzes pilnībā automātisko hematoloģijas analizatoru zīmols ir ieguvis visaugstāko pārliecības indeksu par asins analīzes precizitāti.
Intensīvu treniņu un profesionālu sporta aktivitāšu laikā ir nepieciešams pastāvīgi veikt hematoloģisko analīzi, lai noteiktu eritrocītu skaitu un to parametrus (tilpumu, piesātinājumu ar hemoglobīnu), hemoglobīnu un hematokrīta līmeni. Nevajadzētu ļaut hematokrītam paaugstināties virs 50% - tas noved pie asins sabiezēšanas, kas savukārt ir saistīts ar muskuļu un iekšējo orgānu asinsrites pasliktināšanos, paaugstinātu trombozes risku (trombofilijas tieksmi var novērtēt ar marķieri) D-dimērs). Turklāt ir nepieciešama pilnīga dzelzs metabolisma kontrole (dzelzs koncentrācija serumā, kopējā un nepiesātinātā dzelzs saistīšanās spēja, dzelzs piesātinājuma procents, transferīns, feritīns, C reaktīvais proteīns) un folijskābes un B12 vitamīna līmeņa noteikšana asinis. Visi šie savienojumi ir nepieciešami pareizai eritropoēzei, un tiem nevajadzētu pieļaut trūkumu sporta aktivitāšu laikā. Papildus iepriekš minētajiem testiem ir nepieciešams kontrolēt paša eritropoetīna līmeni.
Kur nopirkt EPO?
Mūsu vietnē jūs varat iegādāties EPO ar piegādi visā pasaulē. Neatkarīgi no tā, kurā valstī jūs dzīvojat, jūs saņemsiet paku bez problēmām muitā un neriskējot zaudēt naudu. Lai veiktu pasūtījumu, jums nav nepieciešams apmeklēt ārstu vai izrakstīt recepti.
Mūsu krājumā vienmēr ir vairāku veidu un paaudžu EPO:
Alfa epoetīns ( Binocrit , Eprex , Eralfon , Epocrin, Procrit)
Beta epoetīns ( Vero epoetīns , Epostim , Eritropoetīns Binnopharm , Recormon )
NESP ( Aranesp )
CERA ( Mircera )
Cik maksā EPO?
Mūsu EPO cenas ir atkarīgas no zāļu izcelsmes valsts, ražošanas veida (ampulas/flakoni/šļirces), kā arī no iepirkuma cenas.
Zemākā cena sākas no 30 USD vienam 2000 SV flakonam (piemērots izmēģinājuma pasūtījumam).
Vairumtirgotājiem pēc pieprasījuma varam piedāvāt vairumtirdzniecības cenas.
EPO piegāde
Mēs piegādājam EPO uz visām pasaules valstīm, ieskaitot tās, kurās ir stingra muitas kontrole. Mēs varam garantēt lielākās daļas mūsu EPO produktu piegādi bez muitas kontroles. Ja jūs dzīvojat Austrālijā, Jaunzēlandē, Vācijā, Šveicē, Austrijā, Itālijā vai Amerikas Savienotajās Valstīs un jūs jau izmisīgi vēlaties iegūt EPO, mēs esam jūsu vienīgā iespēja.
Pēc jūsu pieprasījuma mēs varam noorganizēt tiešu vai tranzīta piegādi no Eiropas (cenas un pieejamās zāles tiek apspriestas individuāli).